بهینه سازی شرایط استخراج آنزیمی پروتئین و شناسایی پروتئین های ریزجلبک سندسموس آبلیکوس

مقدمه: هدف از این مقاله بهینه سازی شرایط استخراج پروتئین ریزجلبک سندسموس به روش آنزیمی با استفاده از تکنیک سطح پاسخ و شناسایی پروتئین‌های استخراج شده از این ریزجلبک می‌باشد.مواد و روش‌ها: بهینه سازی شرایط استخراج آنزیمی پروتئین به کمک نرم‌افزار minitab به روش سطح پاسخ طرح مرکب مرکزی، برای فاکتورهای نسبت آنزیم به سوبسترا و زمان اثر آنزیم (آنزیم‌های سلولاز و مولتی آنزیم تحت شرایط بهینه ph) طراحی شد. سپس بهترین تیمار از نظر بیشترین راندمان استخراج در کمترین زمان بهینه سازی شد و در پایان پروتئین‌های استخراج شده به روش الکتروفورز شناسایی شدند. یافته‌ها: نتایج نشان داد هرچه غلظت آنزیم افزایش یابد درصد استخراج و راندمان استخراج پروتئین بیشترمی‌شود به طوری که با افزایش غلظت از 2 به 6 میکرولیتر آنزیم بر میلی لیتر سوبسترا راندمان استخراج به کمک آنزیم مولتی آنزیم از 15.28 به 27.87 درصد و برای سلولاز از 16.88 به 21.42 درصد به ترتیب افزایش یافته است. بهینه شرایط محاسبه شده در بالاترین غلظت و کمترین زمان پاسخگوئی برابر 6.84 میکروگرم بر میلی لیتر به مدت 2.34 ساعت به ازای 0.5 گرم وزن خشک بدست آمد. نتایج بررسی‌های الکتروفورز به روش sds- page نشان داد پروتئین‌های استخراج شده از این ریزجلبک حاوی 8 باند پروتئینی با وزن ملکولی بین 110-20 کیلودالتون (kda) می‌باشد. همچنین شاخص شیمیایی پروتئین که معیاری است برای ارزیابی کیفیت پروتئین برای این ریز جلبک به میزان 0.4-0.2 محاسبه شد. نتیجه‌گیری: استخراج پروتئین به کمک تیمار آنزیمی در مقایسه با تیمار شیمیایی راندمان استخراج بالاتر داشته همچنین به دلیل مقرون به صرفه بودن از نظر اقتصادی، جهت استخراج پروتئین از سوبسترا پیشنهاد می‌گردد. باتوجه به نزدیک بودن شاخص شیمیایی پروتئین‌های این ترکیب با پروتئین غلات، این ترکیب به عنوان یک منبع پروتئینی پیشنهاد می‌گردد.