تشخیص باسیلوس کواگولانس در محصولات پروبیوتیک به روش مولکولی Pcr

مقدمه: پروبیوتیک‌ها میکروارگانیسم‌های زنده‌ای هستند که اگر در مقادیر کافی تجویز گردند اثرات مفید سلامتی بر روی میزبان خواهند داشت. باسیلوس کواگولانس یک باکتری پروبیوتیکی گرم مثبت، هوازی تا غیر هوازی اختیاری، کاتالاز مثبت، اکسیداز منفی و تولید کننده اندوسپور می باشد. هدف از این مطالعه شناسایی سریع مولکولی باسیلوس کواگولانس در محصولات پروبیوتیک است که طبق اطلاعات روی برچسب حاوی این باکتری می‌باشد.مواد و روش‌ها: با استفاده از سوش استاندارد باسیلوس کواگولانس آزمون pcr بهینه گردید. حد تشخیص و ویژگی آزمون با استفاده از dna این باکتری بررسی شد. تعداد 7 نمونه محصول پروبیوتیک موجود در بازار ایران جمع‌آوری و روش‌های مختلف استخراج  dnaاز این محصولات بهینه و باسیلوس کواگولانس از طریق pcr مورد بررسی قرار گرفت.یافته‌ها: آزمونpcr بهینه و محصول base pair450 (جفت باز) در ژل آگارز 5/1 درصد مشاهده شد، حد تشخیص در این مطالعه 1000 dna باکتری در آزمون pcr بدست آمد و با هیچ  dna دیگری در آزمون ویژگی تکثیر نگردید. در تمامی محصولات پروبیوتیک ادعا شده حامل باسیلوس کواگولانس، این باکتری مشاهده گردید.نتیجه‌گیری: با توجه به نتایج حاصل از این پژوهش که وجود باسیلوس کواگولانس در تمام نمونه‌ها مشخص شد، می‌توان نتیجه گرفت که pcr روشی سریع و مطمئن جهت شناسایی این میکروارگانیسم در محصولات پروبیوتیک می‌باشد.

Detection of Bacillus Coagulans in Probiotic Products by PCR Molecular Method

Introduction: Probiotics are microorganisms that if administered in adequate amounts wouldhave beneficial effects on the host's health. Bacillus coagulans is a probiotic bacteria whichsometimes mistakenly called Lactobacillus sporogenes. B. coagulans is a gram positive andfacultative aerobic and anaerobic, catalase positive, oxidase negative and endospore formingbacteria. The aim of this study is the rapid molecular detection of B. coagulans in variousprobiotic products.Materials and Methods: PCR test was optimized by using B. coagulans standard strain.Limit of detection (LOD) and specificity of this test were investigated by using related speciesof DNA. Samples of probiotic products which contain B. coagulans were collected from theIranian market and various methods of DNA extraction were optimized for these products.Results: Amplicon with the size of 450bp was amplified by PCR test and observed byelectrophoresis method. In specificity test none were positive using DNA for intendedorganisms. B. coagulans species were identified in all the samples by PCR method.Conclusion: According to the results of this study B. coagulans was detected in all samples.It was concluded that PCR is a reliable and accurate method to identify these products thatmight contain B. coagulans probiotics bactria.