بیان ژن کد کننده پروتیین E2 ویروس اسهال ویروسی گاو در E. coli

اسهال ویروسی گاو (bovine viral diarrhea) یکی از بیماری های ویروسی بسیار مهم این حیوان است که به وسیله یک پستی ویروس (bvdv) از خانواده فلاوی ویریده، ایجاد میشود. bvdv با تاثیرگذاری بر روند تولید مثل نیز خسارت های بسیاری را موجب میشود. پروتیین e2 مهمترین پروتیین ساختمانی این ویروس در القای پاسخ ایمنی محافظت کننده است. هدف از این پژوهش، کلونینگ و بیان ژن پروتیین e2 در باکتری e. coli بود. ژن مورد نظر با استفاده از rt-pcr تکثیر و در پلاسمید pmal-c2x کلون گردید. از طرفی، صحت ردیف نوکلیوتیدی محصول های کلون شده با تعیین توالی نوکلیوتیدی مورد تایید قرار گرفته و بیان پروتیین توسط e. coli با استفاده از روش sds-page بررسی شد. از طرف دیگر، ویژگی آنتی ژنی پروتیین e2 نوترکیب در آزمایش ایمنوبلات تایید گشته و پس از انجام دادن سونیکاسیون سلول های باکتری مشخص گردید که پروتیین نوترکیب به شکل محلول می باشد. این نتایج، نشان دهنده این است که پلاسمید نوترکیب فوق، پروتیین e2 را به صورت کارا بیان میکند.