مطالعه و شناسایی سلول‌های زایای اولیه در گناد جنین قرقاول ماده (phasianus colchicus) با استفاده از تکنیک‌های مختلف بافت‌شناسی

هدف از این تحقیق شناسایی و بررسی حضور سلول‌های زایای اولیه در سنین مختلف جنینی در بافت تخمدان قرقاول بود.  این سلول ها تنها سلول‌های در حال رشد رویان هستند که توانایی انتقال اطلاعات ژنتیکی از طریق گامتوژنز به نسل بعدی را دارند.  به منظور مطالعه در این خصوص، پرندگان به دلیل ویژگی های رشدی خود ارزش فوق العاده ای دارند.  از طرفی قرقاول از جمله پرندگانی است که دارای خواص بسیار مفیدی است اما متاسفانه این گونه نادر در خطر انقراض قرار دارد.  در این مطالعه، تعداد 28 عدد تخم نطفه دار قرقاول مورد استفاده قرار گرفت و گنادهای جنین ماده با توجه به عدم تقارن آن ها متمایز و در روزهای 24 9 جنینی استخراج شدند.  مقاطع بافتی به صورت سریال سکشن تهیه شدند و شناسایی سلول های زایای اولیه با استفاده از رنگ آمیزی های هماتوکسیلین–ائوزین، پریودیک اسید شیف و همچنین تهیه مقاطع نیمه نازک و رنگ آمیزی آن ها با تولوئیدین بلو انجام گرفت.  سپس با استفاده از تکنیک های استریولوژی، تعداد، حجم سلول و حجم هسته سلول‌های زایای اولیه محاسبه گردید.  سلول‌های زایای اولیه در برش های پارافینی و رزینی در روزهای 9 تا 14 جنینی به دلیل ویژگی‌های خاص شامل اندازه بزرگ هسته و سیتوپلاسم کم شناسایی شدند.  ضمناً پاسخ این سلول ها در تمام سنین به رنگ آمیزی پاس منفی بود.  با توجه به نتایج مربوط به مطالعه استریولوژی، مشخص شد با افزایش سن از تعداد سلول های زایای اولیه کاسته می شود به طوری که در 18 روزگی این سلول ها مشاهده نشدند.  در حالی که حجم سلول های زایای اولیه و حجم هسته این سلول ها با افزایش سن افزایش یافته بود.  یافته‌های این مطالعه نشان داد که سلول‌های زایای اولیه در بافت تخمدان جنین‌های قرقاول در تمام سنین آزمایش‌ شده به رنگ آمیزی پریودیک اسید شیف پاسخ منفی دادند در حالی که مشخص شد رنگ آمیزی هماتوکسیلین و ائوزین و استفاده از مقاطع نیمه نازک برای تشخیص میکروسکوپیک این سلول ها مناسب هستند.  از نظر مورفولوژی این سلول در قرقاول تفاوت خاصی با سایر پرندگان نداشت اما از نظر هیستوشیمی پاسخ این سلول به رنگ آمیزی پریودیک اسید شیف منفی بود که با بعضی از گونه های پرندگان متفاوت است.

study and identification of primordial germ cells in the gonad of female pheasant embryo (phasianus colchicus) using various histological techniques

the goal of this study was to detect and evaluate the presence of primordial germ cells in pheasant ovarian tissue at various embryonic ages. these are the only growing cells in the embryo capable of transmitting genetic information to the following generation via gametogenesis. birds are quite useful for research in this area because of their growth features. on the other hand, the pheasant is one of the birds with very beneficial features, but this rare species is at risk of extinction. in this study, 28 fertilized pheasant eggs were used, and the gonads of female embryos were differentiated based on their asymmetry and retrieved between embryonic days 9 and 24. tissue sections were prepared as serial sections and the identification of primordial germ cells was examined using hematoxylin eosin and pas staining, as well as semithin slice preparation and toluidine blue staining. the number of primordial germ cells, cell volume, and nucleus volume of primordial germ cells were then estimated using stereological techniques. early germ cells were recognized in paraffin and resin sections from embryonic days 9 to 14 because of their unique properties, which comprised a big nucleus and little cytoplasm. furthermore, the response of these cells to pas staining was negative at all ages. according to the stereological results, the number of primordial germ cells was decreased at more advanced ages of development, so that it was not seen at 18 day embryo. whereas, the volume of the primordial germ cells and nucleus of these cells have been increased with the increasing of the age. the findings of this study revealed that primordial germ cells in the ovarian tissue of pheasant embryos at all examined ages responded negatively to the pas staining, whereas routine hematoxylin and eosin staining and the use of semithin sections are suitable for microscopic detection of these cells. morphologically, this cell in pheasant was similar to other birds, whereas in terms of histochemistry, the reaction of these cells was negative to pas staining which differs from some species of birds.