ارزیابی ایمنی‌زایی اختصاصی واکسن خوراکی بایوفیلم آئروموناس هیدروفیلا در ماهی کپور معمولی

یکی از روش های محافظت و آهسته رهش نمودن آنتی ژن های واکسنی استفاده از پلیمرهای طبیعی زیست تخریب پذیر مثل کیتین در بستر بایوفیلم باکتریایی می باشد.  باکتری به صورت مجتمع در آمده و توسط بستر پلیمری در شرایط دستگاه گوارش محافظت می شود و نهایتاً آنتی ژن های واکسنی سالم تر و با توان ایمنی زایی بهتر در اختیار سیستم ایمنی مخاطی ماهی قرار داده می شود.  در این روش واکسن بایوفیلم باکتری آئروموناس هیدروفیلا، با کشت باکتری در محیط کشت tsb (0.225 درصد w/v) به همراه کیتین (0.3 درصد w/v) به مدت چهار روز در انکوباتور شیکر دار قرار داده شد.  باکتری سپس با pbs استریل شستشو گردیده و با حرارت غیرفعال شد.  تعدادی ماهی کپور معمولی 11±32 گرمی، به 5 تیمار مساوی و هر تیمار در سه تکرار به صورت زیر تقسیم شدند:  تیمار اول تا چهارم به ترتیب با واکسن بایوفیلم، باکترین، کیتین+ محیط کشت و کیتین، به روش خوراکی طی ده روز ایمن شدند، تیمار پنجم بدون تجویز واکسن به عنوان گروه کنترل در نظر گرفته شد.  نمونه گیری از سرم ماهیان در روزهای صفر، 20، 40 و 60 صورت گرفت.  عیار آنتی بادی ضد باکتری در نمونه ها با آزمایش الایزا و توسط آنتی بادی مونوکلونال ارزیابی گردید.  نتایج نشان داد عیار آنتی بادی ضد باکتری آئروموناس هیدروفیلا در تیمار بایوفیلم خوراکی در روز 20 نسبت به بقیه تیمارها معنی دار بوده است اما در روز 40 و 60 معنی دار نبوده است.

evaluation of specific immunogenicity of aeromonas hydrophila biofilm oral vaccine in common carp

one of the methods of protection and slow release of vaccine antigens is the use of biodegradable natural polymers such as chitin in the bacterial biofilm substrate. the bacterium is complex and protected by the polymer substrate in the conditions of the digestive system, and finally, healthier vaccine antigens with better immunogenicity are provided to the intestine mucosal immune system of the fish. in this method, biofilm vaccine of aeromonas hydrophila bacteria was done by culturing the bacteria in tsb medium (0.225% w/v) along with chitin (0.3% w/v) for 4 days in a shaker incubator. afterward bacteria were washed with sterile pbs and were inactivated by heat. a number of common carp of 32 ± 11 g were divided into 5 equal treatments and each treatment was repeated three times as follows: the first to fourth treatment with biofilm vaccine, bacterin, media chitin and chitin + tsb respectively, by oral method during 10 days were immunized; the fifth treatment without vaccine administration was considered as the control group. sampling of fish serum was done on days 0, 20, 40 and 60. antibacterial antibody level in the samples was evaluated by elisa test and by monoclonal antibody. the results showed that the antibody level of aeromonas hydrophila in oral biofilm treatment on day 20 was significant compared to the other treatments, but it was not significant on days of 40 and 60.