بررسی وضعیت آلودگی به بروسلا ملی‌تنسیس و مقایسه روش‌های مولکولی و غیر مولکولی تشخیصی آن در یکی از مراکز پرورش سگ اطراف تهران

بروسلوز ناشی از بروسلا ملی تنسیس یکی از بیماری های مهم بهداشتی و اقتصادی در ایران است که توجه به آن به عنوان یک بیماری زئونوز بسیار حایز اهمیت می باشد.  هدف از این مطالعه بررسی وضعیت آلودگی به بروسلا ملیتنسیس در یک مرکز پرورش سگ در اطراف تهران و مقایسه روش های آزمایشگاهی مختلف برای تشخیص عفونت ناشی از بروسلا ملیتنسیس در سگ ها و انتخاب بهترین روش (ها) برای تشخیص سریع عارضه بوده است.  نمونه های خون کامل (برای انجام آزمون pcr و کشت)، سوآب واژن (برای انجام آزمون pcr) و نمونه سرم (برای انجام آزمون های سرولوژی رزبنگال، رایت  و 2 مرکاپتواتانول (2me) از 14 قلاده سگ ماده موجود در یک پرورشگاه سگ اطراف تهران که در آن یک قلاده سگ ماده به علت عفونت با بروسلا ملیتنسیس سقط کرده بود، جمع آوری شد.  افزون بر آن نمونه منی و خون کامل از تنها قلاده سگ نر آن پرورشگاه برای انجام آزمون pcr گرفته شد.  کشت تمام نمونه های خون منفی بود.  در آزمون pcr انجام شده بر روی نمونه های خون و سوآب واژن اخذ شده از سگ های ماده (14 نمونه) به ترتیب 7 نمونه (50 درصد) و 8 نمونه (57.1 درصد) مثبت مشاهده شد که با استفاده از پرایمرهای طراحی شده گونه به روش مولتی پلکس، در تمام موارد بروسلا ملیتنسیس تشخیص داده شدند.  بر اساس نتایج آزمون سرولوژی از 14 سرم جداسازی شده از سگ های ماده برای آزمون غربالگری رزبنگال، هشت نمونه مثبت و در آزمون های رایت و 2 مرکاپتواتانول تنها یک نمونه مثبت مشاهده شد.  نتایج حاصله نشان داد که حساسیت و ویژگی نتایج نمونه های pcr در نمونه های سوآب واژن 100 درصد بوده است و عملکرد عالی (ضریب کاپا=1) بین نتایج آزمون رزبنگال و pcr نمونه های سوآب واژن در تشخیص بروسلا ملیتنسیس در سگ‌هایی که در مراکز پرورش قرار داشته، وجود دارد.  در سگ های مشکوک به بیماری بروسلوز توصیه می شود ابتدا نمونه گیری از خون حیوان جهت انجام تست رزبنگال انجام شود و در صورت مثبت بودن نتیجه، جهت تایید تشخیص و نیز مشخص کردن سویه بروسلا، نمونه سوآب واژن جهت انجام تست pcr اخذ شود.

investigating the status of brucella melitensis contamination and comparing different molecular and non-molecular diagnosis methods in one of kennel dogs in suburb of tehran- iran

brucellosis caused by brucella melitensis is one of the important health and economic diseases in iran is very important to pay attention to it as a zoonotic disease. the aim of the study was to investigate b. melitensis infection in a kennel dog and also to compare different laboratory methods to diagnose brucella melitensis infection in dogs. in this study, the whole blood samples (for pcr and culture), vaginal swabs samples (for pcr tests) and serum samples (for rose bengal, wright and 2 mercaptoethanol tests) were obtained from 14 bitches at a kennel, in which a bitch had been aborted due to brucella melitensis infection. also, the whole blood sample and semen sample were obtained from the only male dog of this kennel for pcr test. finally, the data obtained from these tests were analyzed by calculating the sensitivity and specificity as well as the kappa coefficient. bacteriological culture results of all blood samples were negative. the pcr results of seven blood samples (%50) and eight vaginal swab samples (%57.1) obtained from 14 bitches were positive. by using pcr primers, b. melitensis were identified in all positive samples. in the serological test, out of 14 sera obtained from bitches for the rose bengal screening test, eight positive samples were observed, but only one positive sample was observed in wright and 2 mercaptoethanol tests. the results showed that the sensitivity and specificity of pcr test in vaginal swab samples was 100% and there is an excellent performance (kappa coefficient = 1) between the results of the rose bengal test and pcr of vaginal swab samples in the diagnosis of brucella melitensis in dogs. in dogs suspected of brucellosis, at first it is recommended to take a sample of the animal’s blood to perform the rose bengal test, and if the result is positive, to confirm the diagnosis and to determine the strain of brucella, then a vaginal swab sample should be taken to perform the pcr test.