تاثیر سطوح مختلف پروتئین و جایگزینی dl متیونین با l متیونین بر بیان ژن‌های میوژنیک در بلدرچین ژاپنی

این تحقیق به منظور بررسی اثر سطوح مختلف پروتئین (20 و 24 درصد) و جایگزینی dl متیونین با l متیونین، بر بیان ژن‌های میوژنیک (آتروژین-1 و myf-5) با اسفاده از تکنیک rt-qpcr در بلدرچین ژاپنی انجام شد.  این آزمایش به صورت فاکتوریل 2×2 در قالب طرح کاملا تصادفی با چهار تیمار و چهار تکرار و 15 قطعه بلدرچین در هر تکرار به اجرا در آمد.  تیمار اول شامل dl متیونین و پروتئین 20 درصد بوده که گروه کنترل ما بود.  تیمار دوم شامل l متیونین و پروتئین 24 درصد، همچنین تیمار سوم شامل l متیونین و پروتئین 20 درصد بوده و تیمار چهارم شامل dl متیونین و پروتئین 24 درصد بودند.  پس از 35 روز تغذیه و نگهداری بلدرچین ها، به دنبال 8 ساعت گرسنگی، از هر تکرار 2 بلدرچین کشتار و قطعه‌ای از بافت ماهیچه سینه ی آن ها به همراه ازت مایع به آزمایشگاه منتقل و در دمای 80– سانتی گراد ذخیره شدند.  پس از استخراج rna کل، کیفیت آن اندازه گیری گردید و برای تولید و سنتز cdna مورد استفاده قرار گرفت.  در نهایت بیان ژن‌های آتروژین-1 و myf-5 با استفاده از تکنیک real-time qpcr ارزیابی شد.  در این روش ژن بتااکتین به عنوان ژن خانه دار (منبع) جهت نرمال نمودن داده‌ها استفاده شد.  نتایج این آزمایش نشان داد که با کاهش سطح پروتئین از 24 درصد به 20 درصد  بیان ژن آتروژین-1 افزایش و بیان ژن myf-5 کاهش پیدا کرده است.  به علاوه، جایگزینی dl متیونین با l متیونین تاثیری بر بیان ژن های آتروژین-1 و myf-5 ندارد.  نتایج بیان کننده ی این موضوع بود که می‌توان dl متیونین جیره را با l متیونین در جیره ی بلدرچین ژاپنی جایگزین کرد و سطح پروتئین 24 درصد در جیره از 20 درصد مناسب تر است.

The effect of substitution to DL-methionine with L-methionine and dietary protein levels on Expression Myogenic Genes in Japanese quail

This research was conducted to investigate the effect of different levels of protein (20 and 24%) and the replacement of methionine DL with L methionine on the expression of myogenic genes (atrogin-1 and MYF-5) using the RT-qPCR technique in Japanese quail. This experiment was done in the form of a 2×2 factorial with 4 treatments and 4 repetitions and 15 quail in each replicate. The first treatment included DL-methionine and 20% protein (control group). The second treatment consisted of L methionine and 24% proteins, and the third treatment included L methionine and protein 20% and the fourth treatment included DL-methionine and protein 24%. After 35 days of feeding and keeping the quails, with 8 hours interval of hunger, 2 quails were slaughtered in each replicate, and a piece of their chest has been removed immediately and was transferred to the laboratory with Liquid nitrogen, and froze in -80°c. After extraction of the whole RNA, its quality was measured and was used to generate and synthesis the cDNA. Eventually, the expression of myogenic genes was measured by the real-time PCR method. In this method, 𝜷-actin gene, as the source gene, was used to normalize the data. The results showed that by decreasing the protein level from 24% to 20%, atrogin-1 gene expression increased and the MYF-5 gene expression decreased. Also, the replacement of methionine DL with L-methionine did not have a significant effect on the expression of myogenic genes. The results indicated that DL-methionine could be replaced with L methionine, and a 24% protein level is more suitable than 20% in the Japanese quail diet.