مقایسه روش‌های مختلف ردیابی قارچ Rosellinia necatrix در خاک

برای دستیابی به روش ساده و حساس جهت ردیابی قارچ rosellenia necatrix عامل پوسیدگی رزلینیایی ریشه در خاک و ریشه، مقایسه ای بین روش های کشت مستقیم خاک و ریشه آلوده در محیط کشت های ,mear mear+ پنکونازول و meas، تکنیک nested pcr و تله‌گذاری صورت گرفت. استخراج مستقیم dna از خاک و ریشه ها انجام شد و ردیابی بیمارگر با استفاده ازآغازگرهای اختصاصیr2، r8 و r7، r10 در nested pcr انجام شد. به منظور بررسی رابطه بین میزان مایه‌زنی اولیه و زمان لازم بعد از مایه‌زنی بیمارگر برای ردیابی و بروز علایم بیماری، آزمایشی در دو تکرار انجام شد، تکرار اول مقدار 2، 4، 8، 16، 32 گرم بذر گندم آلوده به عنوان زاد‌‌مایه اولیه به خاک اضافه و سپس گیاه باقلا به عنوان گیاه آزمون کشت شد. نمونه برداری در یک ماه و هر هفت روز یک بار انجام شد. درتکرار دوم مقدار مایه‌زنی 25/0 ، 5/0، 1، 2، 4، 8 ، 16، 32 گرم بذر گندم آلوده و زمان های نمونه‌برداری 0، 2، 4، 8، 16، 32، 64 و 128 روز تغییر یافت. نتایج نشان داد با افزایش مایه تلقیح، زمان لازم جهت ردیابی و بروز علایم بیماری کاهش می‌یابد، هم‌چنین مشخص گردید بیمارگر قبل از این که روی میزبان ایجاد بیماری کند به وسیله nested pcr قابل ردیابی است. روش nested pcr از سایر روش‌های به کار برده شده مناسب‌تر و سریع‌تر تشخیص داده شد.