اثر عصاره گیاه تلخ‌بیان (sophora alopecuroides l.) بر مهار پمپ acrab–tolc در باکتری e. coli

باکتری‌‌های گرم منفی مقاوم چند دارویی، عفونت‌های واقعاً غیرقابل درمان را سبب می‌شوند. پمپ‌های انتشار به خارج نقش کلیدی در ایجاد مقاومت دارویی در باکتری‌ها دارند. acrab-tolc شناخته‌شده‌‌ترین پمپ انتشار به خارج است که اهمیتی برجسته در ایجاد فنوتیپ مقاوم چند دارویی در باکتری e. coli دارد. مهار این پمپ‌ راهکاری برای مقابله با مقاومت دارویی است. هدف این پژوهش بررسی اثر عصاره گیاه تلخ‌بیان (sophora alopecuroides l.) بر مهار پمپ acrabtolc در موتان‌های e. coli بوده ‌است. عصاره حاوی آلکالوئیدهای تام برای سنجش حداقل غلظت مهاری (mic) به‌صورت تنها و ترکیب با سیپروفلوکساسین استفاده شد. موتان‌های مقاوم با غلظت کمتر از mic عصاره، در دوره‌های زمانی مختلف پیش‌تیمار شده و بعد mic سیپروفلوکساسین تعیین شد. بیان ژن acra در موتان‌های تیمار شده و نشده با عصاره در حضور و عدم حضور سیپروفلوکساسین با تکنیک pcr زمان واقعی سنجش شد. نتایج نشان داد که عصاره به تنهایی اثر ضدباکتریایی دارد و در غلظتی کمتر از mic، در ترکیب با سیپروفلوکساسین، دارای اثر سینرژیستی است. همچنین در پیش‌تیمار 36 ساعته موجب کاهش mic سیپروفلوکساسین شد. نتایج pcr زمان واقعی نشان داد که پیش‌تیمار با عصاره منجر به کاهش بیان ژن acra شد. در نتیجه، عصاره گیاه در موتان‌های e. coli مقاوم چند دارویی، احتمالاً همانند یک مهارکننده پمپ عمل می‌کند. بنابراین جداسازی بهتر آلکالوئیدهای گیاه و بررسی اثرات آنها می‌تواند راهکاری را برای ساخت داروی جدید فراهم کند.

Effects of Sophora alopecuroides L. extract on AcrABTolC pump inhibition in E. coli

Gramnegative multidrug resistant bacteria cause untreatable infections. Efflux pumps have a key role in generation of multidrug resistant bacteria. The inhibition of this pump is a strategy against drug resistance. The aim of this research was to study the effect of Sophorea alopecuroides L. extract on inhibition of AcrABTolC pump in E. coli mutants. The extract containing total alkaloids, was used to measure minimum inhibitory concentration (MIC) of extract alone and in combination with ciprofloxacin. Resistant mutants were pretreated with a concentration lower than MIC for different time periods and then MIC was measured for ciprofloxacin. The expression of acrA in mutants treated or untreated with the extract in present and absent of ciprofloxacin was assayed. Results showed that the extract had antibacterial activity by itself and in a concentration lower than MIC in combination with ciprofloxacin had synergistic effect. Meanwhile, a 36hour pretreatment caused decrease in MIC of ciprofloxacin. Results of real time PCR showed that treatment with extract led to decrease in acrA expression. In conclusion, the extract of Sophorea alopecuroides in E. coli multi drug resistant mutants possibly acts as a pump inhibitor. Therefore, better isolation of plant alkaloids and study their effects could provide a strategy for the synthesis of new drug.