مقایسه دو روش فیزیکی و آنزیمی برداشت سلول از ظرف کشت از طریق فلوسایتومتری

زمینه: کشت سلول به‌منظور دستیابی به اهداف آزمایشگاهی مختلفی صورت می گیرد. جداسازی سلول از ظرف کشت برای انجام آزمایشات دیگر به روش های مختلفی انجام می شود. یکی از این روش های جداسازی سلول چسبنده از ظرف، استفاده از آنزیم های جداکننده مانند تریپسین است. این عمل ممکن است توام با اثرات جانبی ناشی از تاثیر هضم آنزیمی بر سایر جنبه‌های حیاتی سلول ها باشد. برای اجتناب از این امر با روش استفاده از ابزار فیزیکی، می توان سلول ها را از ظرف جدا کرد. به‌نظر می رسد آسیب فیزیکی، بقا سلول ها را نیز تهدید می کند. در این مقاله، این دو نوع آسیب با استفاده از روش فلوسایتومتری بررسی و مقایسه می شوند.روش ها: دودمان سلولی mkn45 که از نـوع سلول هـای سرطانی معـده بـوده و در محیط rpmi با دمـای ?c37 و 5 درصد دی‌اکسید کربن کشت داده شده و بعد از رسیدن به تراکم 80 درصد ، به دو روش هضم و فیزیکی از ظرف کشت، جدا و وضعیت حیاتی سلول ها از طریق روش فلوسایتومتری مورد بررسی و سپس آنالیز قرار گرفته است.یافته ها: نتایج حاصله نشان داد که برداشت فیزیکی، نسبت به روش آنزیمی، سبب وقوع نکروز سلولی بیشتری می شود. این اختلاف معنادار از طریق مشاهدات میکروسکوپی مورد تایید بوده است.نتیجه گیری: با توجه به وقوع مرگ سلولی کم‌تر ناشی از اعمال هضم آنزیمی، به‌نظر می‌رسد که روش هضم آنزیمی در مقایسه با روش فیزیکی برای برداشت سلول از ظرف کشت روش بهینه تری است.