|
|
بهینهسازی روش استخراجrna از بافت پوست شاخه درختان خانواده مخروطیان
|
|
|
|
|
نویسنده
|
حائری زاده فائزه ,معصومی اصل اسد ,آزادی پژمان ,رجبی معماری حمید ,ابوفاضلی نفیسه
|
منبع
|
تحقيقات ژنتيك و اصلاح گياهان مرتعي و جنگلي ايران - 1395 - دوره : 24 - شماره : 1 - صفحه:102 -113
|
چکیده
|
فرآیند استخراج rna از بافتهای سخت چوبی و بهطور خاص درختان خانواده مخروطیان بهدلیل داشتن غلظتهای بالایی از ترکیبات فنولیک، پلیساکاریدها، متابولیتهای ثانویه و لیگنین، بسیار مشکل است و تا بهحال هیچگونه کیت تجاری برای این منظور ساخته نشده است. در این مطالعه مشکلات فوق برطرف گردیده و روشی سریع، ساده و اقتصادی برای استخراج rna از بافت ساقه گونههای cedrus deodara و abies grandis که هر دو از خانواده مخروطیان میباشند، ارائه شده است. نسبت جذب نوری در طول موجهای 260 به 280 و 260 به 230 نانومتر، بهترتیب 88/1 و 1/1 برای گونه cedrus deodara و 8/1 و 9/0 برای گونه abies grandis بهدست آمد. تغییرات صورت گرفته در جهت بهینهسازی استخراج rna نیز شامل استفاده از تیمار پیشگرما روی بافر استخراج، کاهش دور سانتریفیوژ حذف آلودگی dna و حذف depc میباشد. ساخت cdna با استفاده از rna استخراج شده با موفقیت انجام و واکنش rt-pcr باندهای مورد انتظار را تولید نمود. لذا بهنظر میرسد این روش برای استخراج rna از بافتهای چوبی مناسب است.
|
کلیدواژه
|
بافت چوبی ,ترکیبات فنولیک ,درخت نراد ,depc
|
آدرس
|
دانشجوی کارشناسی ارشد، اصلاح نباتات، دانشگاه, دانشجوی کارشناسی ارشد، اصلاح نباتات، دانشگاه یاسوج، یاسوج, ایران, نویسنده مسئول مکاتبات، استادیار، دانشکده, نویسنده مسئول مکاتبات، استادیار، دانشکده کشاورزی، دانشگاه یاسوج، یاسوج پست الکترونیک: masoumiasl@yu ac ir, ایران, پژوهشگاه بیوتکنولوژی کشاورزی ایران, استادیار، پژوهشکده بیوتکنولوژی کشاورزی ایران، کرج, ایران, دانشگاه شهید چمران اهواز, استادیار، دانشکده کشاورزی، دانشگاه شهید چمران، اهواز, ایران, عضو شرکت دانش بنیان زیست فناوران نوین گیتی, عضو شرکت دانش بنیان زیست فناوران نوین گیتی ژن، تهران, ایران
|
پست الکترونیکی
|
aboofazelia@yahoo.com
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Authors
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|