بررسی تغییرات مرفولوژیکی سلول های کشت داده شده ی کبدی در معرض آلاینده ی بنزوآلفاپایرن در ماهی هامور معمولی (epinephelus coioides)

کبد یکی از مهم ترین اندام های بدن جانوران محسوب می شود که به عنوان اندام سم زدا و پالایشگر سموم بدن شناخته می شود و در اغلب مطالعات توکسیکولوژیک به عنوان اندام هدف مورد استفاده قرار می گیرد. برای انجام این مطالعه، از 8 عدد ماهی هامور معمولی نابالغ (نر و ماده به تعداد مساوی) استفاده شد. سپس ماهی بیهوش و سر آن ها از بدن جدا شد. بدن ماهی توسط الکل اتانول 70% ضدعفونی و پس از جدا کردن بافت کبد، به قطعات ریز تقسیم و توسط آنزیم کلاژناز تیپ 4 هضم شدند. سلول های کبدی به مدت 2 هفته در دمای c °30 و میزان 20% (fbs: fetal bovine serum) به همراه its (insulin- transferin- selenium)  کشت داده شدند، سپس دوزهای آلودگی (µm 100، µm 100*2 ،µm100*3) به نمونه ها اضافه و در زمان های صفر، 6، 12 و 24 ساعت مطالعه شدند. مرفولوژی سلول ها توسط میکروسکوپ معکوس و درصد بقا توسط سنجش mtt (methyl thiazolyl tetrazolium: متیل تیازول تترازولیوم) ارزیابی گردید. آنالیز مرفولوژی نشان داد که دوز 100µm موجب القا 50 درصد مرگ سلولی می شود و به کارگیری غلظت های پایین آلاینده بنزوآلفاپایرن طی تیمار 24 ساعت اثر مهار تکثیر وابسته به دوز و زمان داشته و در دوزهای بالاتر باعث لیز شدن سلول ها و نکروزیس می شود.

study of morphological changes in liver primary cell culture exposed to benzo[a]pyrene in grouper fish, epinephelus coioides

the liver is one of the most important organs of animals that know as a detoxifying and filtering toxin in the body and the most studies was used the target organ. in peresent study, hepatocytes were isolated from 8 immature grouper fish (equal to the number of male and female). then, anesthetized fish and the head was separated from the body. the fish wiped with 70% etanol alchol. the liver was removed was cuted with scissors. finally, the cells digested by collagen type 4. then, the cells incubated in 30^c and 20% fbs+its during two weeks. the doses of pollutant (100 µm, 2*100 µm, 3*100 µm) added to samples, then were studied in 0, 6, 12 and 24 time. the morphological analysis exhibited that the cell death incubated by b[a]p polluted by concentration of 100 µm results in 50% of apoptosis cell death. our finding from this study showed that using lower dosage of b[a]p during 24h treatment period cause inhibition of proliferation in time and dose dependent manner and higher doasage cause lysis and necrosis.