جداسازی انتخابی اکتینوباکتری های مرتبط با اسفنج های خلیج فارس و ارزیابی فعالیت سیتوتوکسیک و آنتی اکسیدانی متابولیت های آنها

اهداف پژوهش حاضر ارائه فرایندی برای جداسازی انتخابی اکتینوباکتری های مرتبط با اسفنج های خلیج فارس و همچنین یافتن جدایه های مولد متابولیت های آنتی اکسیدان و سیتوتوکسیک بود. نمونه برداری از 4 گونه اسفنج پیرامون جزیره لارک واقع در خلیج فارس با استفاده از غواصی انجام شد. برای جداسازی انتخابی از 7 تیمار فیزیکی و شیمیایی و 4 محیط کشت استفاده شد. سنجش فعالیت آنتی اکسیدانی متابولیت های استخراج شده با استفاده از روش سنجش مهار رادیکال‌های آزاد دی فنیل 1 ﭘﯿﮑﺮیل ﻫﯿﺪرازیل (dpph) و فعالیت سیتوتوکسیک با استفاده از آزﻣﻮن سمیت ﻣﯿﮕﻮی آب ﺷﻮر بصورت مایکرودایلوشن انجام شد. از 114 جدایه اکتینوباکتری 38.59 درصد از اسفنج dysidea avara جداسازی شدند. محیط کشت اسفنج دریایی آگار (msa) با جداسازی 44 جدایه بیشترین کارایی را از لحاظ فراوانی ارائه نمود. در حالی که محیط مارین زوبل آگار (mza) بیشترین میزان جدایه های غیر استرپتومایسس را جداسازی نمود. تیمار حرارت دادن با جداسازی 35.08 درصد از جدایه های اکتینوباکتری بیشترین فراوانی را ایجاد نمود. 46 درصد از متابولیت های استخراج شده بیش از 90 درصد رادیکال‌های آزاد dpph را در محدوده ic50 ازg/ml μ230.1 تا 775.34 مهار نمودند. در حالی که 44 درصد از متابولیت های استخراج شده بیش از 90 درصد سلول های آرتمیا را در محدوده lc50 ازg/ml μ 65.15 تا 782.32 از بین بردند. این پژوهش ضمن ارائه یک فرایند جداسازی انتخابی، حضور و پتانسیل بالای اکتینوباکتری ها را به عنوان بخشی از میکروبیوتای فعال مرتبط با اسفنج های خلیج فارس نشان داد. جدایه های بدست آمده می‌توانند منبع بالقوه ای برای یافتن ترکیبات طبیعی دارویی باشند.

Selective Isolation of the Persian Gulf Sponge-associated Actinobacteria and Evaluation of Cytotoxic and Antioxidant activity of Their Metabolites

Spongeassociated actinobacteria are the prolific sources of marine natural products. The aims of the present study were to propose a process for selective isolation of spongeassociated actinobacteria and to find isolates that produce antioxidant and cytotoxic metabolites. We collected 4 sponge species from the Larak Island, Persian Gulf using scuba diving. The selective isolation process was performed by 4 culture media and 7 physical and chemical treatments. Antioxidant activity of extracted metabolites were evaluated using DPPH radical scavenging activity. Evaluation of cytotoxicity of the extracted metabolites was carry out using brineshrimp microwell cytotoxicity assay. Out of 114 actinobacterial isolates, 38.59% was isolated from sponge Dysedia avara. Marine sponge agar medium exhibited maximum efficiency and isolated 44 isolate of actinobacteria. While, most non streptomyceslike isolates were derived by marine zobell agar. Heat treatment isolated 35.08% of actinobacterial isolates and recovered their most frequency. Approximately, 46 % of the extracted metabolites scavenged more than 90% of the DPPH radicals and their IC50 ranges from 230.1 to 775.34 micro;g/ml. While, 44% of the extracted metabolites were able to kill more than 90% of the Artemia cells at LC50 range from 236.3 to 565.3 micro;g/ml. These results represented a selective isolation process for sponge associatedactinobacteria and also could provide an evidence that confirms the active association of the actinobacteria with the Persian Gulf sponges.