بررسی تفرق ژنوتیپی سویه های مقاوم به اتامبوتول در ساب تایپ های مختلف مایکوباکتریوم توبرکلوزیس با استفاده از Allele-Specific PCR و Spoligotyping

زمینه و هدف: اتامبوتول یکی از 4 داروی اصلی در درمان بیماری سل محسوب می‏گردد. شایع ترین موتاسیون مرتبط با این دارو معمولا در ژن embb کدون 306 رخ می‏دهد. هدف از این مطالعه، تعیین مقاومت به اتامبوتول با استفاده از روش allele-specific pcr و spoligotyping در سویه‏های مختلف مایکوباکتریوم توبرکلوزیس است.روش کار: 140 نمونه خلط از بیماران مشکوک به سل ریوی جمع آوری و با استفاده از روش پتروف، هضم و آلودگی‏زدایی گردید. سپس حساسیت دارویی به روش تناسبی و استخراج dna روی 106 مورد کشت مثبت به دست آمده انجام گردید. dna های استخراج شده برای ارزیابی جهش در ژن embb کدون 306 با استفاده از روش allele-specific مورد بررسی قرار گرفتند. برای تعیین ساب تایپ ها از روش اسپولیگوتایپینگ استفاده شد.یافته ها: از 106 نمونه کشت مثبت، 36 نمونه (9/33?) توسط روش تناسبی مقاوم به اتامبوتول بودند. با استفاده از روش allele-specific نود و سه سویه حساس و 13سویه (6/27?) مقاوم به اتامبوتول بودند که مقاومت دارویی این سویه ها، با روش تناسبی هم خوانی، حساسیت 97 درصدی داشت. همچنین مشخص شد که موتاسیون در باز اول 5/61? و در باز سوم 5/38? بوده است. براساس روش اسپولیگوتایپینگ نمونه های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس شناسایی شد. از میان آنها 3 خانواده haarlem,cas,t بیش‏ترین درصد موتاسیون در ژن embb را به خود اختصاص دادند. نتیجه گیری: برطبق نتایج به دست آمده، آن دسته از سویه هایی را که نتوانستیم با روش allele-specific شناسایی کنیم می‏توان فرض کرد که یا موتاسیون در ژن‏های دیگری بجزemb رخ داده و یا مکانیسمی به غیر از موتاسیون باعث ایجاد مقاومت شده که باید مورد بررسی قرار گیرند.