تشخیص مولکولی پنوموسیستیس جیرووسی در نمونه‬های لاواژ برونکوآلوئولار در بیماران مبتلا به اختلالات مختلف ریوی

زمینه و هدف: پنوموسیستیس جیرووسی( pneumocystis jirovecii)، در افرادی که دچار ضعف سیستم ایمنی هستند باعث ذات الریه پنوموسیستوزی (pcp) شده و از عوامل جدی ایجاد مشکلات متعدد ریوی در بیماران مبتلا است. این مطالعه با هدف بررسی اپیدمیولوژی مولکولی پنوموسیستیس جیرووسی و تعیین فراوانی این ارگانیسم در بیماران ریوی مراجعه کننده به بیمارستان شریعتی تهران انجام شد. روش کار: در این مطالعه توصیفی مقطعی از مرداد 1399 تا مرداد 1400 تعداد 367 نمونه لاواژ برونکو آلوئولار (bal) بیماران ریوی بستری در بخش ریه بیمارستان شریعتی وابسته به دانشگاه علوم پزشکی تهران جمع آوری شد. رنگ آمیزی گیمسا برای بررسی وجود ارگانیسم و روش حساس nested-pcr برای شناسایی مولکولی بر روی همه نمونه‌ها انجام شد. پس از استخراج dna  تکثیر قطعه ژن 18s ribosomal rna  (18srrna) مربوط به پنوموسیستیس جیرووسی انجام شد. محصولات نهایی nested-pcr جهت تایید قطعی تعیین توالی شدند. یافته ها: از 367 نمونه ای که از لحاظ میکروسکوپی و مولکولی بررسی شدند، پنوموسیستیس جیرووسی با آزمایش میکروسکوپی در یک نمونه (0.27%) و با روش nested-pcr  در 28 نمونه (7.6%) شناسایی شد. در هفت (25%) بیمار دچار نقص ایمنی و 21 (75%) بیمار دارای ایمنی کامل پنوموسیستیس جیرووسی جداسازی شد. تب، تنگی نفس و سرفه خشک شایعترین نشانه‌های بالینی در بین بیماران دارای پنوموسیستوزیس بودند. بیماران ریوی، مستعد کلونیزه شدن توسط پنوموسیستیس بوده که هم خطر ابتلا آن ها به پنوموسیستوزیس وجود دارد و هم آن ها را تبدیل به مخزنی جهت انتقال به افراد مستعد می کند. نتیجه گیری: نتایج بدست آمده از روش مستقیم و مولکولی مطالعه حاظر نشان داد تعداد قابل توجهی از بیماران مبتلا به بیماری‌های ریوی توسط پنوموسیستیس جیرووسی کلونیزه شدند که ممکن است در این بیماران به پنوموسیستوزیس و احتمالا پنومونی تبدیل شود یا ممکن است ارگانیسم را به سایر بیماران مستعد منتقل کند. همچنین  nested-pcrمی تواند روش مناسبی برای تشخیص پنوموسیستیس جیرووسی باشد زیرا از حساسیت و ویژگی بسیار بالایی برخوردار است.

molecular detection of pneumocystis jirovecii in the bronchoalveolar lavage samples in patients with various pulmonary disorders(original article)

background: pneumocystis jirovecii (p. jirovecii) causes pneumocystis pneumonia (pcp) in people, especially the immunocompromised ones. it is also one of the serious causes of numerous lung problems in affected patients. since documented data about p. jirovecii is not available in patients with pulmonary infections in tehran, this study aimed to investigate the molecular epidemiology and parasitology of pneumocystis to determine the frequency of the organism infection. methods: bronchoalveolar lavage (bal) samples were collected for 367 patients hospitalized in the lung department of shariati hospital in tehran from july 2022 to july 2023. the samples were analyzed using giemsa staining and molecular methods. after dna extraction from samples, nested polymerase chain reaction (nested pcr) was employed for the amplification of the 18srrna gene and identification of p. jirovecii. the pcr products of nested pcr were sequenced for final confirmation.  results: out of 367 samples, only one sample (0.27%) and 28 samples (6.7%) were found to be positive through parasitology and nestedpcr analysis, respectively. p. jirovecii was detected in seven (25%) and 21 (75%) immunocompromised and immunocompetent patients, respectively. fever, shortness of breath and dry cough were the most common clinical symptoms among patients with pneumocystosis. patients with pulmonary disorders are prone to colonization by pneumocystis, which increases the risk of pneumocystosis and makes them a reservoir for transmission to susceptible people.conclusion: it can be concluded that patients with distinct lung disease are prone to colonization by pneumocystis and, importantly, are at risk of infection. also, according to the current study, nested pcr was a suitable method for detecting p. jirovecii organisms because it had a very high sensitivity and specificity.