بررسی ایمنی زایی آنتی ژن63pa به صورت آزاد و بارگذاری شده در نانوذره plga در موش سوری

مقدمه: تاکنون واکسن ایده الی برای بیماری سیاه زخم تایید نشده است. آنتی ژن 63pa دارای خاصیت آنتی ژنیک بوده و برای تولید نسل های جدید واکسن از این آنتی ژن استفاده می‌کنند. اهداف: هدف کلی این تحقیق، بررسی توان تولید آنتی بادی و ایمنی زایی آنتی ژن نوترکیب 63pa بارگذاری شده در نانوذرات plga در موش سوری به عنوان کاندیدای واکسن احتمالی است. مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، وکتور حاوی ژن 63pa به درون باکتری coli.e 21bl 3de ، ترانسفورم و میزان بیان پروتئین آن به وسیله sds-page موردارزیابی قرارگرفت. پس از تخلیص پروتئین های نوترکیب با ستون کروماتوگرافی، پروتئین های نوترکیب درپلیمر plga بارگذاری شدند و جهت مطالعه ایمنی زایی دردونوبت متوالی به موش ها تزریق شد. نتایج: اندازه وپتانسیل زتای نانوذرات حاوی نانوذرات حاوی پروتئین63pa، 261/9 نانومترو -34/4 میلی ولت اندازه گیری شد. عکس های الکترونی گرفته شده از نانوذرات، نشان دهنده کروی بودن نانوذرات و صحت اندازه وپتانسیل زتای نانوذرات بود. میانگین تیترآنتی بادی تولیدی علیه پروتئین نوترکیب 63pa به صورت بارگذاری شده نسبت به آزاد، افزایش داشت. نتیجه گیری: در این تحقیق با توجه به مزایای سیستم های نانوذرات در کاهش خطرات احتمالی پروتئینی و همچنین احتمال افزایش ایمنی زایی آن به عنوان سیستم های تحویل نوین واکسن های پروتئینی، از نانوذرات بر پایه پلیمرهای سنتزی حاوی پروتئین 63pa استفاده شد. نانوذره plga با خصوصیات مختلف از نظر خواص فیزیکی و شیمیایی متفاوت، الگوی رهایش، نحوه سنتز و میزان بارگیری مورد مطالعه قرار گرفت تا بهترین شکل پلیمر برای بارگذاری پروتئین ها مشخص شود.

investigating the immunogenicity of pa63 antigen in free form and loaded in plga nanoparticle in mice

background: so far, an ideal vaccine for anthrax has not been approved. pa63 antigen has antigenic properties, and scientists use this antigen to produce new generations of vaccines. the main aim of this research is to investigate the ability to produce antibodies and immunogenicity of pa63 recombinant antigen-loaded in plga nanoparticles in mice as a potential vaccine candidate.  methods: in this experimental study, the vector containing the pa63 gene was introduced into de3 bl21 e. coli bacteria, and their transformation and protein expression levels were evaluated by page-sds. after purifying the recombinant proteins with column chromatography, the recombinant proteins were loaded in plga polymer and injected into mice three times in a row to study immunogenicity.  results: the size and zeta potential of nanoparticles containing nanoparticles containing pa63 protein were measured as 261.9 nm and -34.4 mv. electron photographs of nanoparticles show the spherical shape of nanoparticles and the correct size and zeta potential. the mean antibody titer produced against pa63 recombinant protein was increased in the loaded form compared to the free one.  conclusion: in this research, due to the advantages of nanoparticle systems in reducing possible protein risks and also the possibility of increasing its immunogenicity as new delivery systems of protein vaccines, nanoparticles based on natural and synthetic polymers containing pa63 protein were used. plga nanoparticles with different characteristics in terms of different physicochemical properties, release patterns, synthesis methods, and loading rates were studied to determine the best form of polymer for protein loading.