تاثیر پلاسمای تازه منجمد شده (ffp) و لیزات پلاکت انسانی (hpl) بر روی میزان تکثیر سلول‌های بنیادی مزانشیمی انسان (mscs) مشتق از بافت چربی و خون بند ناف

هدف: سلول‌های بنیادی مزانشیمی (mscs) جمعیت سلولی هستند که دارای توانایی تکثیر و تمایز بالقوه‌ای بوده، اما چالش‌هایی در مورد شرایط کشت آن‌ها وجود دارد. سرم جنین گاوی (fbs)، با وجود ترکیبات نامشخص، ایمنی‌زایی بالقوه و انتقال احتمالی پریون/زئونوز، متداول‌ترین افزودنی محیط کشت برای کشت‌های آزمایشگاهی است. به این دلیل، تلاش‌های قابل‌ توجهی برای یافتن یک جایگزین مناسب برای fbs، مانند محیط فاقد سرم یا لیزات پلاکتی انسانی (hpl) و پلاسمای تازه منجمد (ffp) صورت گرفته است. هدف از این مطالعه بررسی اثرات استفاده هم‌زمان از ffp، hpl و fbs بر تکثیر سلول‌های بنیادی مزانشیمی مشتق از خون بند ناف و بافت چربی بود.مواد و روش‌ها: در مطالعه‌ی حاضر 5 کیسه کنسانتره پلاکتی از سازمان انتقال خون ایران، پایگاه جهرم تهیه گردید. لیزات پلاکتی توسط عمل انجماد و ذوب کنسانتره پلاکتی تهیه و سلول‌های مرده از لیزات پلاکتی به وسیله‌ی سانترفیوژ جدا شدند. mscs از بافت چربی شکم زیر ناف، 5 بیمار تحت عمل هرنیا یا سزارین، و از خون بند ناف 10 نوزاد تازه متولد شده تهیه گردید. سلول‌های گروه کنترل همراه با fbs، و سلول‌های گروه آزمایش در یکی از گروه‌های fbs، fbs+ffp، ffp+hpl و fbs+ffp+hpl کشت داده شدند. فنوتیپ سلول‌های بنیادی مزانشیمی توسط آنالیز فلوسایتومتری مورد تایید قرار گرفت و زنده ماندن با استفاده از روش mtt بررسی گردید.یافته‌ها: نتایج نشان دادند که، استفاده از fbs+ffp،fbs+hpl ، ffp+hpl و fbs+ffp+hpl منجر به افزایش معنی‌داری در تکثیر mscs نسبت به گروه حاوی fbs تنها می‌شود و هم‌چنین میزان viability سلول‌ها نیز افزایش معناداری نسبت به گروه fbs پیدا می‌کند.نتیجه‌گیری: این مطالعه نشان داد که fbs+ffp،fbs+hpl ، ffp+hpl  و fbs+ffp+hpl اثر مساعدی بر میزان رشد و تکثیر mscs داشته و به‌وضوح، این اثرات بیولوژیکی به‌علت وجود فاکتورهای رشد و سایتوکاین‌های تولیدی توسط سلول‌های خونی می‌باشد. این مطالعه تایید می‌کند که ffp+hpl که به عنوان مکمل در برخی محیط‌های کشت استفاده می‌شود، ممکن است جایگزین خوبی به‌جای fbs در محیط کشت mscs در نظر گرفته شود. 

the effect of fresh frozen plasma (ffp) and human platelet lysate (hpl) on the proliferation rate of human mesenchymal stem cells (mscs) derived from adipose tissue and umbilical cord blood

introduction: mesenchymal stem cells (mscs) are cells that can replicate and differentiate into cells of multiple organs. however, there are challenges regarding their cultivation conditions. fetal bovine serum (fbs) is the most commonly used culture medium additive for in vitro cultures, despite its undefined composition, potential immunogenicity, and possible prion/zoonotic transmission. for these reasons, significant efforts have been targeted at finding substitutes, such as serum-free media or human platelet lysates (hpl) and fresh frozen plasma (ffp). this study aimed to investigate the effects of the simultaneous use of ffp, hpl, and fbs on the proliferation of mscs derived from umbilical cord blood and adipose tissues.materials and methods: in this study, five platelet concentrate bags were obtained from the iranian blood transfusion organization, the branch of jahrom. relatively, the platelet lysate was prepared by repeated freezing/thawing method, and dead cells were separated from platelet lysate by centrifugation. mscs were isolated from the adipose tissue of five patients undergoing hernia surgery or cesarean, and from the umbilical cord of 10 newborns. the cells were cultured in control (fbs) and experimental (fbs+ffp, ffp+hpl and fbs+ffp+hpl) groups. cells of msc phenotype were confirmed by flow cytometric analysis and viability was examined using the mtt assay.results: the results showed that the proliferation and viability of mesenchymal stem cells were increased significantly in the fbs+ffp, fbs+hpl, ffp+hpl, and fbs+ffp+hpl groups compared to the fbs group.conclusion: in this study, it was shown that fbs+ffp, fbs+hpl, ffp+hpl, and fbs+ffp+hpl had a beneficial effect on the growth and proliferation of mscs. it seems these biological effects are due to the presence of growth factors and cytokines produced by blood cells. this study confirms that ffp+hpl as a supplement in some culture media may be considered a suitable alternative instead of fbs for the msc culture media.