اثر استرس کشت در محیط فاقد سرم بر نتایج کشت مختلط سلول‌های تک هسته‌ای طحال موش: معرفی تعدیل‌گر ایمنی جدید

هدف: پیوند مغز ‌استخوان و سلول های ایمنی یک روش رایج برای درمان برخی از بیماری‌های خونی در سراسر جهان است. با این حال به دلیل بدتنظیمی سیستم ایمنی استفاده از آن همیشه کارآمد نمی‌باشد. در این مطالعه برآنیم تا پتانسیل استرس کشت در محیط فاقد سرم را در تنظیم سیستم ایمنی ارزیابی کنیم.مواد و روش‌ها: سلول‌های تک هسته‌ای طحال با استفاده از روش گرادیان فایکول از موش‌های balb/c و c57bl/6 جدا شدند. سلول‌های موش c57bl/6 در شرایط دارای سرم و فاقد سرم در نقاط زمانی مشخص کشت یافتند و میزان بقاء سلول‌ها به روش mtt تعیین گردید. سپس جهت تعیین آلوژنیسیته‌ی سلول‌های مذکور، کشت مختلط لنفوسیتی (مدل آزمایشگاهی پیوند) با سلول‌های طحال موش balb/c انجام شد و با استفاده از روش mtt تکثیر سلولی مورد بررسی قرار گرفت و عکس‌های لازم تهیه گردید.یافته‌ها: میزان بقاء سلول‌های ایمنی پس از 72 ساعت کشت در محیط فاقد سرم نسبت به گروه کنترل 82.1% بود. هم‌چنین پس از 24 ساعت، آلوژنیسیته‌ی این سلول‌ها نسبت به سلول‌‌‌های کنترل به‌طور معنی‌داری کاهش یافت (p<0.01). این کاهش در نقاط زمانی 48و 72 ساعت بارزتر شد (p<0.0001)؛ به میزانی که پاسخ لنفوسیت‌های موش balb/c به سلول‌های استرس یافته کم‌تر از سلول‌هایی بوده است که هیچ‌گونه محرکی دریافت نکرده‌اند (p<0.0001). یافته‌های مورفولوژی به وضوح این کاهش را تائید می‌کنند.نتیجه‌گیری: استرس ناشی از کشت در محیط فاقد سرم موجب کاهش آلوژنیسیته و تعدیل آلوری اکتیویتی سلول‌های ایمنی می‌شود. در آینده استفاده ازمدل‌ حیوانی موش می‌تواند کاربرد این تکنیک را در پیوند مغز استخوان روشن‌تر سازد.

Effect of serum starvation stress on the mouse spleen mononuclear cells mixed culture: Introducing a new immunomodulatory method

Introduction: Bone marrow and immune cell transplants are a common method of treating some blood diseases around the world. However, due to the malfunction of the immune system, its use is not always effective. In this study, we evaluated the potential of culture stress in serumfree medium in regulating the immune system.Materials and Methods: Spleen immune cells were isolated from Balb/C and C57bl/6 mice using the Ficol gradient method. C57bl/6 mice splenocytes were cultured in serum starved and nonstarved conditions at indicated time points. Cell viability was determined by MTT assay. Then the allogenicity of these cells was determined by mixed lymphocytic culture (in vitro model of bone marrow transplantation) with Balb/C mouse splenocytes and cell proliferation was then examined using MTT method and necessary photographs were prepared too.Results: The viability rate of starved immune cells after 72 h was 82.1% of the control group. After 24h, the allogenicity of these cells decreased significantly compared to the control cells (P<0.01). This decrease was more pronounced at 48h and 72 h (P<0.0001). Even the response of Balb/C lymphocytes to stressed cells was less than that of background control, (P<0.0001). Morphological findings clearly confirm this reduction.Conclusion: Serum starvation inducedstress decrease allogenicity and modulates immune cells alloreactivity. In the future, the use of mouse model could shed light on the application of this technique in bone marrow transplantation.