تولید و تعیین خصوصیات بیوشیمیایی آنزیم ال - آسپاراژیناز توسط مخمر بومی جداشده از خاک‌های ایران

هدف: استفاده از آنزیم ال-آسپاراژیناز به عنوان داروی شیمی درمانی، یکی از راه کارهای موثر در درمان لوکمی لنفوبلاستی است. از آنجا که ال-آسپاراژیناز باکتریایی، که در حال حاضر مورد استفاده قرار می گیرد باعث ایجاد عوارض جانبی ناشی از واکنش های افزایش حساسیت می شود، جستجو برای یافتن منابع جدید، بسیار مورد توجه است. در این مطالعه، ویژگیه ای ال-آسپاراژیناز تولید شده توسط مخمرهای بومی جداشده از خاک های کشور مورد بررسی قرار گرفته است. مواد و روش ها: در این پژوهش 130 جدایه مخمری مورد بررسی قرار گرفت که در نهایت جدایه ag90 با تولید 0/94iu/ml طی 5 روز به عنوان بهترین جدایه انتخاب شد. یافته ها: شناسایی مولکولی جدایه ag90 نشان داد که این جدایه با 99% به.sarocladium sp شباهت دارد و به عنوان ag90 .sarocladium sp در نظر گرفته شد. بررسی مایع تخمیر سویه منتخب نشان داد که 86% آنزیم به صورت خارج سلولی تولید می شود. مقادیر km و vmax آنزیم تولید شده برای سوبسترای ال - آسپاراژین به ترتیب 9/74 میلی مولار و 19/19 میکرومول در دقیقه محاسبه گردید. نتیجه گیری: نتایج به دست آمده در این پژوهش می تواند به معرفی آنزیم جدید با منشا یوکاریوتی در جهت کاهش سمیت، حساسیت زایی و عوارض جانبی ناشی از مصرف دارو کمک کند.

Production and characterization of biochemical properties of LAsparaginase by indigenous yeast isolated from soil of Iran

Introduction: The use of Lasparaginase as a chemotherapeutic agent is an effective strategy for the treatment of leukemic lymphoblasts. Since the use of bacterial Lasparaginase causes side effects due to hypersensitivity reactions, search for new enzyme sources is one of the active research areas. In this study, the characterization of produced Lasparaginase by indigenous yeast strains was investigated.Material and methods: In this study, 130 yeast strains were evaluated. Remarkably, AG90 isolate with 0.94 IU/ml enzyme production was selected as the superior strain.Results: The molecular identification of the AG90 showed that this strain exhibited a high level of similarity (99%) with Sarocladium sp. and introduced as a Sarocladium sp. AG90. The fermentation broth of the superior strain showed that 86% of the enzyme was produced extracellularly. The Km and Vmax values of the produced enzyme for the LAsparagine substrate were calculated as 9.74 mM and 19.19 μmol/min, respectively.Discussion: The obtained results in this study can help to introduce a new enzyme with eukaryotic origin to reduce the toxicity, sensitivity and side effects associated of drug consumption.