بررسی تاثیر آپوپتوتیک انتقال ژن آپوپتین به رده سلولی مالتیپل میلوما

هدف: از زمان شناسایی مالتیپل میلوما، دومین بدخیمی شایع هماتولوژیک، پیش رفت های شگرفی در جهت افزایش میزان طول عمر بیماران صورت گرفته است. در دوره ای که استفاده راه کارهای درمانی جدید رو به افزایش است، کلون کردن ژن های القاءکننده آپوپتوز در ژنوم سلول های بدخیم به طور چشمگیری مورد توجه قرار گرفته است. در این مطالعه، اثر ضد سرطانی وکتور بیان کننده ژن آپوپتین را در رده سلولی مشتق شده از مالتیپل میلوما (kmm-1) بررسی شد.مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی، به منظور انتقال ژن آپوپتین به رده سلولی kmm-1، وکتور لنتی ویروسی بیان کننده آپوپتوتین ساخته شد. سپس از با استفاده از تکنیک فلوسیتومتری و quantitative realtime pcr به ترتیب کارایی ترانس داکشن و بیان ژن آپوپتین مورد ارزیابی قرار گرفت. در ادامه، اثر ضدسرطانی بیان ژن آپوپتین در رده سلولی kmm-1 به روش mtt و تریپان بلو مورد بررسی قرار گرفت.یافته ها: نتایج فلوسایتومتری نشان داد که وکتور بیان کننده آپوپتین به صورت موفقیت آمیز و با کارایی ترانس داکشن بیش از 90% به درون سلول های kmm-1 انتقال یافته است. هم چنین دریافتیم که بیان بیش از حد آپوپتوتین، که با افزایش میزان mrna به حدود 8 برابر مشخص شد، می تواند سبب القا اثر سایتوتوکسیک در سلول های مالتیپل میلوما گردد. نتایج نشان داد که بیان آپوپتوتین نه تنها زندهمانی سلول ها را به طور قابل ملاحظه ای کاهش داد (p<0.001)، بلکه به طور به طور مشخص فعالیت متابولیک را نیز مهار کرد (p<0.001).نتیجه گیری: این مطالعه نشان داد که وکتور بیان کننده ژن آپوپتین دارای اثر ضد سرطانی در مالتیپل میلوما بوده و می تواند در آینده نزدیک از نظر بالینی قابل دسترس باشد. ;

Apoptotic effect of apoptin gene transduction on multiple myeloma cell line

Introduction: Following the first description of multiple myeloma (MM), as the second most prevalent hematologic malignancy, multiple promising advances have paved the way to increase the longlasting complete remission for patients. In the era of the novel therapeutic approaches, the cloning of the apoptosisinducing genes into the genome of malignant cells has attracted tremendous attention. In this study, we aimed to evaluate the anticancer effect of apoptinexpressing vector on multiple myelomaderived KMM1 cell line.Materials and Methods: In this experimental study, we constructed the lentiviral vector expressing apoptin for transferring this gene into KMM1 cells. Transduction efficiency and apoptin gene expression were further confirmed by flow cytometric and quantitative realtime PCR analysis, respectively. Afterwards, the antisurvival effect of overexpressed apoptin on KMM1 cells was also evaluated by applying MTT, and trypan blue assays.Results: The results of flow cytometric analysis demonstrated that the apoptinexpressing vector was successfully transduced into KMM1 cells, with the transduction efficiency of more than 90%. In addition, we found that the overexpression of apoptin, as revealed by 8fold increase in its mRNA level, exerted a remarkable cytotoxic effect in MM cells. The resulting data declared that apoptin expression not only significantly reduced cell viability (P < 0,001) but also potently halted KMM1 metabolic activity (P < 0.001).Conclusion: This study highlighted the promising anticancer effect of lentiviral vector expressing apoptin in multiple myeloma that may be clinically accessible in the near future.