ارزیابی روش تشخیصی real time pcr مبتنی بر آنالیز منحنی ذوب جهت تشخیص ایزوله‌های بالینی استافیلوکوک اورئوس و ژن عامل مقاومت به متی‌سیلین

هدف: تشخیص سریع وبه موقع استافیلوکوک اورئوس می تواند نقش قابل توجهی در درمان عفونت های استافیلوکوکی داشته باشد. با طراحی روش های دقیق که دارای حساسیت و اختصاصیت قابل قبولی هستند، می توان شناسایی گونه و حتی سویه های مقاوم به آنتی بیوتیک را انجام داد. هدف از این مطالعه ارزیابی روش تشخیصی real time pcr مبتنی بر آنالیز منحنی ذوب جهت تشخیص ایزوله های بالینی استافیلوکوک اورئوس و ژن عامل مقاومت به متی سیلین می باشد.مواد و روش ها: در این مطالعه تجربی از ایزوله های بالینی استافیلوکوک ذخیره شده در بانک میکروب شناسی دانشگاه علوم پزشکی همدان استفاده شد. طراحی پرایمر با انتخاب سایت های هدف و ژن its برای استافیلوکوک اورئوس و ژن meca برای سویه های مقاوم به متی سیلین صورت گرفت. جهت تعیین اختصاصیت و حساسیت آنالیتیک پرایمرهای طراحی شده از آزمون real time pcr و روش آنالیز منحنی ذوب dna سویه های مورد مطالعه استفاده شد.یافته ها: اختصاصیت آنالیتیک پرایمرهای طراحی شده با استفاده از آنالیز منحنی ذوب dna جهت شناسایی استافیلوکوک اورئوس در 83.79 درجه سانتی گراد و استافیلوکک اورئوس مقاوم به متی سیلین در 76.6 درجه سانتی گراد به دست آمد. حساسیت آنالیتیکی پرایمرهای طراحی شده نیز بر اساس نمودارهای حدآستانه و رقت های تعیین شده، برای ژن its توانایی شناسایی بیش از 15 cfu باکتری و برای ژن meca توانایی شناسایی بیش از 25 cfu باکتری را نشان داد.نتیجه گیری: طراحی پرایمرهای مناسب و به کارگیری تکنیک های مولکولی حساس، می تواند دو عامل تعیین کننده در طراحی روش های سریع و دقیق جهت شناسایی باکتری های مهاجمی مانند استافیلوکوک اورئوس باشد.