تغییرات ریختشناسی لایه رنگ‌دانهدار شبکیه و سلولهای فوتورسپتور آسیب‌دیده بعد از پیوند سلول‌های بنیادی به فضای زیر شبکیه

هدف: بیماری های تخریبی شبکیه مهم ترین علت نابینایی غیرقابل برگشت است. یکی از روش های درمانی امیدبخش در این بیماری ها استفاده از سلول های بنیادی است. دراین بین سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان به عنوان یکی از سلول های ایمن می تواند در تولید سلول های آسیب دیده و درمان این بیماری ها نقش مهمی ایفا نماید. هدف این مطالعه، بررسی تغییرات ریخت شناسی لایه رنگ دانه دار شبکیه و سلول های فوتورسپتور آسیب دیده بعد از پیوند سلول های بنیادی به فضای زیر شبکیه بود.مواد و روش ها: مدل تخریب لایه رنگ دانه دار شبکیه با استفاده از تزریق سدیم یدیت در سینوس پشت چشم موش های صحرایی رنگ دانه دار انجام شد. بعد از 28 روز از تزریق سدیم یدیت و تائید تخریب لایه رنگ دانه دار، برای پیوند سلولی مورد استفاده قرار گرفت. برای پیوند سلولی، در مرحله اول تولید سلول های رنگ دانه دار از تمایز دو مرحله ای سلول های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان استفاده شد. برای این کار سلول های بنیادی از مغز استخوان ران موش صحرایی استخراج شد بعد از پاساژ سوم با استفاده از محیط تمایزی به سلول های رنگ دانه دار تمایز داده شد. سلول های تولیدشده به فضای زیر شبکیه مدل های ایجادشده تزریق شدند. 30 روز بعد از پیوند سلولی، بررسی های بافتی از جمله بررسی لایه رنگ دانه دار و شمارش تعداد هسته ها در لایه هسته ای خارجی شبکیه با استفاده از رنگ آمیزی کریزل ویولت انجام شد. یافته ها: بررسی ایمونوسیتوشیمی سلول های تمایزیافته نشان داد که درصد بالایی ( ±93) از این سلول ها مارکرهای اختصاصی (rpe65, cralbp) سلول های رنگ دانه دار را نشان دادند. این سلول ها به موش های صحرایی دارای آسیب لایه رنگ دانه دار تزریق شدند. بررسی های بافتی این نمونه ها بعد از 30 روز نشان داد که لایه رنگ دانه دار و لایه هسته ای خارجی فوتورسپتورها بهبود یافته و تعداد سلول ها در این لایه ها در مقایسه با گروه کنترل افزایش یافته است.نتیجه گیری: تولید سلول های رنگ دانه دار شبکیه مشتق شده از سلول های بنیادی مغز استخوان که از نظر بیان ژن های اختصاصی شبیه به سلول های طبیعی باشند و هم چنین بعد از پیوند در بافت بتوانند فعالیت فیزیولوژیک از خود نشان دهند و موجب بهبودی شوند در درمان بیماری های تخریبی شبکیه بسیار مفید هستند.

Morphological changes in injured retinal pigment epithelium and photoreceptor cells after transplantation of stem cells into subretinal space

Introduction: Degenerative retinal diseases are main cause of irreversible blindness. Stem cells therapy is a promising way in these diseases. Therefore, mesenchymal stem cells because of its safety can produce degenerated cells and can play important role in treatment. The aim of this study was to examine morphological changes in injured retinal pigment epithelium (RPE) and photoreceptor cells after transplantation of stem cells into subretinal space.Materials and Methods: Retinal pigment epithelium injury induced with retroorbital sinus injection of sodium iodate in pigmented rats and following histological verification, ready for transplantation. The generation of retinal pigment epithelium cells from bone marrow stromal stem cells were done in two steps. First, Bone marrow stromal stem cells isolated from rat femoral bone and after passage three differentiated into retinal pigment epithelium cells. Generated cells transplanted into sub retinal space of animal model and after 30 days the morphological analysis such as retinal pigment epithelium layer and cell count in outer nuclear layer of retina performed.Results: Differentiated cells expressed high yield ( plusmn;93) of specific markers (RPE65, CRALBP) in immunocytochemistry. These cells transplanted into injured pigmented layer and after 30 days showed improvement in retinal pigment epithelium and outer nuclear cell layer. In other words, the cell count in these layer increased in comparing to control group.Conclusion: The generation of retinal pigment epithelium cells from bone marrow stromal stem cells which in term of expression of specific genes are similar to native RPE cells, as well as after transplantation into damaged tissue can show physiological activity are very useful in treatment of degenerative eye diseases.