بررسی تاثیر تیمار با antimir-182بر روی افزایش حساسیت به داروی سیس پلاتین در سلول‌های hela

مقدمه: mirna‌ها مولکول‌های rna تک رشته‌ای غیرکدکننده به طول حدود 21 تا 23 نوکلئوتید هستند که ترجمه نمی‌شوند و در کنترل بیان ژن نقش مهمی دارند. آنها به‌عنوان انکوژن یا تومور ساپرسور نقش مهمی در بروز برخی سرطان‌ها دارند. در گزارشات مختلف mir-182 به‌عنوان آنکومیر در سرطان گردن رحم معرفی شده است که مانع از انجام آپوپتوز در سلول می‌گردد. هدف از مطالعه حاضر بررسی تاثیر antimir-182 در رده سلولی سرطانی hela روی القای آپوپتوز در حضور داروی سیس پلاتین و کاهش مقاومت دارویی می‌باشد.مواد و روش‌ها: پس از کشت سلول‌های hela با افزودن دوزهای مختلف داروی سیس پلاتین و بررسی میزان مرگ و میر سلول‌ها به‌روش mtt، میزان ld50 دارو به‌دست آمد. سپس با استفاده از حجم‌های مختلف لیپوفکتامین و mir کنترل نشاندار شده شرایط ترانسفکشن بهینه و غلظت اپتیمم antimir-182 محاسبه گردید. در نهایت antimir-182 و سیس پلاتین به‌طور مجزا و همزمان به سلول‌هایhela منتقل و میزان کاهش تکثیر سلولی و افزایش آپوپتوز ناشی از مهار به‌وسیله antimir-182 به تنهایی و همراه با سیس پلاتین با روش mtt و فلوسایتومتری مورد ارزیابی قرار گرفت.نتایج: نتایج حاصل بیانگر آن است که تیمار سلول‌ها با antimir-182 و سیس پلاتین موجب افزایش معنی‌دار مرگ سلول‌ها از 68% (تیمار با سیس پلاتین) به 81% (تیمار همزمان با antimir-182 و سیس پلاتین) شده است (05/0p<). این افزایش به‌صورت آپوپتوز و نکروز سلول‌ها می‌باشد.نتیجه‌گیری: مطالعه حاضر نشان می‌دهد که بیان mir-182 ممکن است در افزایش مقاومت به شیمی درمانی سلول‌های سرطانی نقش داشته باشد. استفاده از antimir-182 توام با سیس پلاتین منجر به تقویت اثر سیس پلاتین و در نتیجه کاهش غلظت ld50 سیس پلاتین می‌شود، بنابراین می‌توان از آن به‌عنوان یک درمان مکمل به‌منظور افزایش حساسیت سلول‌های سرطانی به درمان و کاهش مقاومت دارویی استفاده کرد.

Evaluation of the AntimiR-182 Effects on the Cisplatin Sensitivity in Hela Cells

Introduction: MicroRNAs (miRNAs) are single-stranded noncoding RNAs of 21–23 nucleotides that are not translated and have a basic role in gene expression.. They have an important role as a oncogene or tumor suppressor in human cancers.It has been reported that miR-182 in cervical cancer is an oncogene which is inhibited apoptosis in tumor cells. The aims of this study was evaluation of the miR-182 inhibition effect on induction of apoptosis in Cisplatin treated Hela cells.Methods: The Hela cells were cultured and treated with different doses of Cisplatin, then viability of cells was assessed with MTT and LD50 of Cisplatin in hela cells obtained.  The transfection condition was optimized by using serial dose of lipofectamine and labeled control miR, then optimum concentration of AntimiR-182 was calculated. Finally, AntimiR-182 and cisplatin separately and simultaneously were transfected into Hela cells, and the reduction in cell proliferation and increased of apoptosis rate of treated cells were analyzed by MTT and flow cytometric assay.Results: The Hela cells which is transfected with both AntimiR-182 and cisplatin became more sensitive to cell death than cells which treated with cisplatin only. We found a significantly increase in cell death (apoptosis and necrosis) from 68% to 81% following the transfection with AntimiR-182 and cisplatin (Plt 0.05).Conclusion: The results of the present study shows that expression of miR-182 may have a significant effect in resistance of tumor cells to chemotherapy. Using simultaneously of AntimiR-182 and cisplatin have an additional effect on cisplatin, so, it reduces LD50 of cisplatin. Therefore, AntimiR-182 can be used as a complementary methods of treatment for increasing sensitivity of tumor cells to treatment and decreasing drug resistance.