طراحی و به‌کارگیری روش lamp در جهت تشخیص مولکولی استرپتوکوک پیوژنز

مقدمه: استرپتوکوکوس پیوژنز کلونیزه‌کننده پوست و گلو در بسیاری از انسان‌ها است. این باکتری علاوه بر عفونت‌های چرکی حاد، مسئول عوارض و بیماری‌های خودایمن بعد از عفونت شامل آرتریت واکنشی، گلومرولونفریت و تب روماتیسمی می‌باشد. روش استاندارد طلایی برای شناسایی استرپتوکوکوس پیوژنز، کشت است. اما به‌دلیل زمان‌بر بودن روش مذکور و اهمیت تشخیص سریع آن، استفاده از روش‌های مولکولی مفید است. تکنیک lamp روش نسبتاً جدیدی است که حساسیت و اختصاصیت بالایی در تشخیص عفونت‌های باکتریایی دارد. هدف از این مطالعه، استفاده از تکنیک lamp براساس ژن ستوکروم اکسیداز (oxaa) برای شناسایی استرپتوکوکوس پیوژنز است.مواد و روش‌ها: روش lamp با 6 پرایمر برای توالی خاص oxaa در استرپتوکوکوس پیوژنز طراحی شد. غلظت‌های مختلفی از سولفات منیزیم، دزوکسی نوکلئوتید تری‌فسفات و پرایمرها برای بهینه‌سازی روش استفاده گردید.نتایج: واکنش lamp با غلظت‌های 10 um از هر کدام از پرایمرهای lb، lf،f3 و b3، 40 um از هر کدام از پرایمرهای fip و bip، 0.4mm dntps و 8mm mgso4 طی 1 ساعت و در دمای 63 درجه سانتیگراد راه‌اندازی گردید.نتیجه‌گیری: روش lamp در مقایسه با pcr روش سریعی برای شناسایی استرپتوکوکوس پیوژنز می‌باشد.