نقش اسیدهای آمینه هیستیدین 16، تیروزین 82 و تریپتوفان 86 در شیفت نوری، فعالیت و پایداری حرارتی فوتوپروتیین اکورین

زمینه: اکورین فوتوپروتیینی حساس به کلسیم است که از آپوآکورین (189 اسید آمینه)، اکسیژن و کوالنترازین (کروموفور ایمیدازوپیرازین) تشکیل شده است. عملکرد این پروتیین نوری در حضور کلسیم، نشر نور آبی (469 نانومتر) است. مطالعات نشان داده است که سه اسید آمینه h16، y82 و w86 در عملکرد و شیفت نوری پروتیین اکورین نقش دارد. در تحقیق حاضر به منظور بررسی ارتباط ساختار- عملکرد پروتیین از جهش‌های ترکیبی استفاده شد تا نقش و اهمیت جایگاه‌های مورد نظر، در حالت تک و ترکیبی، به‌دست آید.مواد و روش‌ها: با استفاده از روش جهش‌های هدفمند، جهش‌های تکی و ترکیبی در پلاسمید مورد نظر انجام گرفت و فوتوپروتیین اکورین در حالات تک جهشی و جهش‌های ترکیبی، به‌دست آمد. در مرحله بعد پایداری حرارتی و فعالیت نوری پروتیین‌های به‌دست آمده با استفاده از لومینومتر، اندازه‌گیری و شیفت نوری آن‌ها با استفاده از اسپکتروفلوریمتر، اندازه‌گیری شد.یافته‌ها: نتایج حاصله نشان داد که نقش جایگاه w86 در شیفت نوری و نقش h16 در عملکرد از سایر موقعیت‌های دیگر بالاتر است. همچنین پایداری حرارتی جهش اعمال شده در موقعیت w86 نسبت به سایر جهش‌ها عملکرد بهتری را نشان می‌دهد.نتیجه‌گیری: این تحقیق نشان داد که جایگاه اسید آمینه w86 در شیفت نوری و پایداری حرارتی اکورین، از y82 و h16 بالاتر است و می‌توان از این جهش جهت تولید پروتیین کاراتر در راستای حسگری و سایر کاربردهای مربوطه استفاده نمود.