بیان ژن‌های آپوپتوتیک در سلول‌های سرطانی mcf-7 پس از القاء با محیط کاندیشنال سلول‌های بنیادی چربی انسانی و عصاره رزماری

زمینه: تاثیر محیط کاندیشنال بر آپوپتوز و تهاجم mcf-7 هنوز مورد بحث است. همچنین گزارش شده کارنوسیک اسید که از ترکیبات عصاره رزماری می‌باشد، از خاصیت ضدسرطانی برخوردار است. لذا در این پژوهش، وقوع آپوپتوز از طریق مسیر وابسته به aif در سلول‌های mcf-7 تیمارشده با محیط کاندیشنال و عصاره رزماری با بررسی بیان ژن های aif، bax، bcl-2، p53 مورد مطالعه قرارگرفت. مواد و روش‌ها: در این تحقیق گروه‌های آزمایشی شامل: سلول هایmcf-7  کشت داده شده در محیط کشت و سرم (کنترل)، سلول‌های کشت داده شده در محیط کاندیشنال حاوی سرم (گروه محیط کاندیشنال)، سلول‌های کشت داده شده در محیط کشت حاوی عصاره رزماری با غلظت‌های متفاوت ( 50 و 100 میکروگرم بر میلی لیتر)، به مدت 24 و 48 ساعت (گروه های تیمار) می‌باشند. میزان تکثیر سلولی با روش mtt بررسی شد. همچنین بیان ژن‌ها با روش rt-pcr بررسی شدند. یافته‌ها: میزان بقاء سلول های تیمار شده با محیط کاندیشنال و سرم به مدت 24 و 48 ساعت، کاهش معنی داری در مقایسه با سلول‌های گروه کنترل نشان داد. در حالیکه افزایش معنی‌دار بقاء سلول‌های mcf-7 کشت داده شده با رزماری 50 و 100 میکروگرم/ میلی‌لیتر حاوی سرم، به مدت 48 ساعت در مقایسه با گروه تیمار شده با محیط کاندیشنال و سرم مشاهده شد. افزایش معنی‌داری در بیان ژن‌های p53، aif و bax و همچنین کاهش معنی‌دار بیان ژن bcl-2 در سلول‌های تیمار شده با محیط کاندیشنال و سرم به مدت 24 و 48 در مقایسه با گروه کنترل مشاهده شد. رزماری 100 میکروگرم/ میلی‌لیتر و سرم پس از 48 ساعت منجر به کاهش معنی‌دار بیان ژن‌های p53، aif و bcl-2 و رزماری 50 میکروگرم/ میلی‌لیتر حاوی سرم پس از 24 و 48 ساعت باعث کاهش معنی‌دار بیان ژن bax در مقایسه با گروه محیط کاندیشنال و سرم گردید. نتیجه‌گیری: مسیر آپوپتوزی وابسته به aif در سلول های mcf-7 پس از تیمار با محیط کاندیشنال پس از 24 و 48 ساعت و رزماری 100 حاوی سرم پس از 48 ساعت فعال گردیده است.

expression of apoptotic genes in mcf-7 can-cer cells after induction with human adipose stem cells conditioned medium and rosemary extract

background: the effect of conditioned medium on apoptosis and invasion of mcf-7 is still debated. carnosic acid, a component of rosemary extract, is also reported to have anti-cancer property. therefore, we studied the occurrence of apoptosis through aif-dependent pathway in mcf-7 cells treated with conditioned medium and rosemary extract by evaluating the expression of aif, p53, bcl-2 and bax genes.method and materials: in this studty, the experimental groups were: cultured mcf7 cells in medium containing serum (control), cultured cells in conditioned medium containing serum (cm group), cultured cells in medium containing different concentrations of rosemary extract (50 and 100 μg / ml) for 24 and 48 hours (treatment groups). the cell proliferation rate was studied by mtt test. gene expression was assessed by rt-pcr.results: the survival rate of cells treated by conditioned medium and serum for 24 and 48 h was significantly decreased as compared to control. meanwhile, there was a significant increase in the survival rate of mcf-7 cells cultured with rosemary 50 and 100 μg / ml containing serum for 48 h, compared to group treated with conditioned medium and serum. a significant increase in p53, aif and bax gene expression, and also a significant decrease in bcl-2 gene expression were observed in cells treated with conditioned medium and serum for 24 and 48h, as compared to the control. rosemary at the concentration of 100 µg/ml and serum for 48 h significantly decreased p53, aif and bcl-2 genes and rosemary at concentration of 50 µg/ml containing serum for 24 and 48 h significantly decreased bax gene expression compared to conditioned medium and serum group.conclusion: the aif-dependent apoptotic pathway was activated in mcf-7 cells after treatment with conditioned medium 24 and 48 h and rosemary 100 containing serum after 48 h.