چگونگی تکوین سلول‌های شبکیه از طریق انتقال ژن PAX6 به سلول‌های CD133+ به دست آمده از بند ناف انسان

چکیدهسابقه و هدف سلول‌های بنیادی cd133+ بند ناف، زیر گروهی از سلول‌های خونساز را تشکیل می‌دهند. ثابت شده که این سلول‌ها از توانایی تمایز خوبی به سمت سلول‌های عصبی برخوردار هستند. ژنpax6 جزیی از خانواده چند ژنی pax و از فاکتور های رونویسی است. ژن pax6 ژن کنترل کننده اصلی تکامل چشم و اندام های حسی بافت های اپیدرمی و عصبی می‌باشد. هدف از این مطالعه، بررسی روند تمایزی سلول‌هایcd133+ به دست آمده از بند ناف که ژن pax6(5a) به آن‌ها انتقال یافته است بود.مواد و روش‌هادر یک مطالعه تجربی، ابتدا سلول‌های تک هسته‌ای خون بند ناف به وسیله فایکول جدا شدند، سپس سلول‌های cd133+ موجود در آن با روش macs جدا‏‏‏‏‏‎‏‏‎‏‎‏‏‏ ‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‎ْو در محیط کشت stem span کشت داده شدند. سپس به منظور ساخت ویروس، وکتور ناقل ژن pax6 و وکتورهای کمکی(pmd2g ، pspax2) به سلول‌های hek293t ترانسفکت شدند. پس از تغلیظ ویروس و تیتر کردن آن، سلول‌های cd133+ با تیتر مطلوب ویروس آلوده شدند. سلول‌های حاوی ویروس مورد نظر، از نظر وجود پروتیین‌های pax6 ، rhodopsin ، chx10 ، thy1 و nestin توسط روش ایمنوسایتوشیمی ارزیابی شدند.یافته‌هاپس از دو هفته پروتیین‌های thy-1 ، chx10 ، nestin و pax6 در سلول‌های آلوده شده بیان شدند. هم چنین بیان مارکرهای rhodopsin و nestin در سلول‌های کنترل مشاهده شد. نتیجه‌گیرینتایج حاصل از این مطالعه بیانگر تمایز سلول‌های cd133+ به سلول‌های پروژنیتوری عصبی و سلول‌های شبه عصبی شبکیه از جمله سلول‌های گانگلیونی می‌باشد.