تاثیر هیپوکسی خفیف بر بنیادینگی سلول‌های cd34+ جدا شده از خون بند ناف در هم‌کشتی با سلول‌های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان انسان

سابقه و هدف خون بند ناف منبعی غنی از سلول‌های بنیادی خونساز است که علاوه بر مزایای فراوان، معایب آن شامل تعداد محدود سلول‌های بنیادی و پیوندپذیری با تاخیر می‌باشد. مسلماً شناسایی استراتژی‌هایی که در کنار افزایش تکثیر سلول‌های بنیادی خونساز یا hsc ، باعث حفظ بنیادینگی آن شوند، می‌تواند اثربخشی پیوند را افزایش دهد. هدف از این مطالعه، بررسی شرایط کشت مختلف در شرایط هیپوکسی (غلظت اکسیژن 5%) بر بیان ژن‌های  hoxb4،c-myc  ، nanog وsox2  در سلول‌های cd34+ خون بند ناف بود. مواد و روش‌ها در این مطالعه مداخله‌ای، سلول‌های cd34+ خون بند ناف انسان جداسازی گردید و در محیط کشت بدون سرم در حضور ترکیب سیتوکاینی (tpo، flt3l ، scf) با یا بدون حضور سلول‌های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان (msc) در غلظت اکسیژن 21% و 5% به مدت 7 روز کشت داده شد (در 5 گروه مختلف). در روز 7 بیان ژن‌های hoxb4 ، c-myc ، nanog ، sox2 با pcr  real timeمورد بررسی قرار گرفت. آزمایش‌ها در 3 بار مستقل انجام شد. تجزیه و تحلیل آماری داده‌ها با استفاده از آزمون anova انجام و < 0.05 >p معنادار در نظر گرفته شد. یافته‌ها بیشترین بیان ژن‌های hoxb4 ،c-myc  ، nanog و sox2 در شرایط کشت hsc با msc مغز استخوان در غلظت اکسیژن 5% بود. نتایج مطالعه افزایش معنادار از نظر آماری در میزان تکثیر و بیان ژن‌های بنیادینگی را در غلظت اکسیژن 5% در مقایسه با 21% نشان داد. نتیجه گیری ترکیب سلول‌های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان و غلظت اکسیژن 5% باعث افزایش ظرفیت بنیادینگی hsc می‌شود و شرایطی شبیه به فضای نیچ را فراهم می‌آورد. 

the effect of mild hypoxia on stemness of cd34+ cells isolated from umbilical cord blood cocultured with human bone marrow mesenchymal stem cells

background and objectives cord blood (cb) is a rich source of  hematopoietic stem cells (hscs). beside the advantage the main disadvantages of cb are  the limited number of stem cells and delayed engraftment. identifying strategies to enhance expansion and maintain stemness of hscs can improve transplant efficiency. the goal of this study was to examine different culture conditions on hoxb4, c-myc, nanog, sox2  gene expression of cb-hscs.materials and methodsin this interventional study, human cord blood cd34+ hsc, were cultured in the serum-free me­dium supplemented with cytokines (tpo, flt3l, scf) with/without  bone marrow mesenchymal stem cell (msc) in 21% o2  and 5% o2 for 7 days. in day 7 the expression of, hoxb4, c-myc, nanog, sox2  genes were evaluated by real time pcr. the data analyzed using the anova test  and value < 0.05 were considered statistically significant.resultshighest rates of  hoxb4, c-myc, nanog, sox2 mrna were seen in coculture of hsc with bone marrow  msc at 5% o2. our findings demonstrated  statistically significant increase of expansion and stemness markers in 5% o2 tension versus 21%.conclusions  bone marrow (bm) -msc and 5% o2 combination enhanced stemness of hsc  and better mimicked the niche microenvironment conditions.