مقایسه میزان کشندگی سلول‌های cd19 car-cik و cd19 car-t در محیط in vitro

سابقه و هدف علی‌رغم موفقیت‌های سلول‌های car-t در درمان بدخیمی‌های خونی، استفاده از منابع آلوژنیک لنفوسیت‌های t برای تولید این سلول‌ها با خطر ایجاد gvhd همراه است. سلول‌های cik سلول‌هایی با خطر پایین gvhd می‌باشند؛ بنابراین سلول‌های car-cik می‌توانند به عنوان جایگزینی بالقوه برای سلول‌های car-t مورد ارزیابی قرار گیرند. مواد و روش‌ها در این مطالعه تجربی، پس از جداسازی و کشت سلول‌های تک هسته‌ای خون محیطی دو اهداکننده سالم، سلول‌های t و cik با استفاده از وکتور لنتی ویروسی حاوی ژن cd19 car ترانسداکت شدند. در روز شانزدهم کشت برای مقایسه کشندگی سلول‌های car-t و car-cik از هم‌کشتی این سلول‌ها با سلول‌های هدف cd19+ k562 استفاده شد و میزان مرگ در بین سلول‌های هدف با استفاده از کیت سنجش لاکتات دهیدروژناز اندازه‌گیری شد. جهت تجزیه و تحلیل آماری از نرم‌افزار  graph pad prism ورژن 8 و تجزیه و تحلیل  student t-test و anova و پست هاک tukey استفاده شد و 0.05 >p معنادار در نظر گرفته شد.یافته‌هادر هر دو گروه سلول ‌های car-t و car-cik گیرنده car موجب افزایش معنادار کشندگی سلول‌ها شد؛ به طوری که تفاوت معناداری بین قدرت کشندگی سلول‌های car-t (1.7 ± 67.8%) و car-cik (1.8 ± 65.1%) مشاهده نشد.نتیجه گیری سلول‌های car-cik در محیط in vitro کشندگی مناسبی را از خود بروز می‌دهند لذا می‌توانند به عنوان جایگزینی برای سلول‌های car-t مطرح باشند. با این حال مطالعه‌های بیشتری جهت مقایسه سایر ابعاد موثر در عملکرد این دو سلول مورد نیاز می‌باشد.  

in vitro comparison of cytotoxicity of cd19 car-cik and cd19 car-t cells

background and objectives despite the success of car-t cells in the treatment of hematologic malignancies, the use of allogeneic sources of t lymphocytes to produce these cells is associated with risk of gvhd. cytokine induced killer (cik) cells are a population with a lower risk of gvhd. therefore, car-cik cells can be evaluated as a potential alternative for car-t cells.materials and methods in this experimental study, after isolation and culture of mononuclear cells isolated from the peripheral blood of two healthy donors, t and cik cells are transduced with cd19 gene containing lentiviral vector. on the 16th day of culture, to compare the cytotoxicity of car-t and car-cik cells, these cells were co-cultured with cd19+ k562 target cells, and the death rate among the target cells was measured using a lactate dehydrogenase release assay kit. student t-test, anova and post-hoc tukey were used for statistical analysis using graph pad prism software 8. a p-value less than 0.05 was considered statistically significant. results in both car-cik and car-t cell, car receptor caused a significant increase in cytotoxicity. so that no significant difference was observed between the cytotoxicity of car-t cells (67.8% ± 1.7) and car-cik (65.1% ± 1.8).conclusions  car-cik cells show a suitable in vitro cytotoxicity, so they can be considered as a potential alternative for car-t cells. however, more preclinical and clinical studies are needed to compare other effective dimensions in the function of these two cell types.