استخراج پپتید دیفنسین از فیلترهای لکوسیتی و تعیین میزان حداقل غلظت بازدارندگی رشد بر استافیلوکوکوس اورئوس

سابقه و هدف شناسایی و کشف آنتی‌بیوتیک ها از دستاورد های مهم بشر در زمینه بیماری های عفونی بوده است، اگر چه پس از زمان کوتاهی، پدیده مقاومت آنتی بیوتیکی ایجاد شد. امروزه نیاز به نوآوری در کنترل عفونت های میکروبی نظیر استفاده از پپتید های ضد میکروبی وجود دارد. این پپتیدها در نوتروفیل ها به وفور یافت می شوند و از آن جایی که فیلترهای کاهنده لکوسیتی منبع ارزشمندی از این سلول ها می باشد، به عنوان یک گزینه در دسترس مورد مطالعه قرار گرفته است. مواد و روش‌هادر یک مطالعه تجربی جامعه مورد مطالعه فیلترهای کاهنده لکوسیتی بودند که با روش نمونه گیری غیر احتمالی آسان انتخاب شدند. ابتدا لکوسیت ها استخراج و سپس نوتروفیل ها جداسازی شد. پپتید دیفنسین پس از سونیکاسیون نوتروفیل ها استخراج شد و خالص سازی پپتید با دستگاه hplc صورت گرفت. باکتری استافیلوکوکوس اورئوس کشت و میزان تلقیح باکتری تعیین و حداقل غلظت بازدارندگی رشد به روش ماکرودایلوشن سنجیده شد. سپس قطر هاله عدم رشد پپتید دیفنسین برای باکتری مورد نظر تعیین گردید. یافته‌ها با استفاده از استاندارد دیفنسین، پیک دیفنسین خالص جمع آوری گردید و حداقل غلظت بازدارندگی رشد به میزان 2/5 میکروگرم بر میلی لیتر برای باکتری استافیلوکوکوس اورئوس به روش ماکرودایلوشن تعیین شد. منطقه مهار رشد در بررسی قطر هاله عدم رشد برابر با 9 میلی متر محاسبه گردید. نتیجه گیری درمان بیماری های عفونی با ظهور گسترده مقاومت های دارویی با چالش مواجه و استفاده از نوآوری های جدید اجتناب ناپذیر شده است. دیفنسین به عنوان پپتید ضدمیکروبی گزینه مناسبی است که در نوتروفیل های حاصل از فیلترهای کاهنده لکوسیتی به وفور یافت می شود و برای تحقیقات در خصوص داروهای جدید ضدمیکروبی پیشنهاد می‌گردد. 

defensin peptide extraction from leukoreduction filters and determination of minimum inhibitory concentration on staphylococcus aureus growth

background and objectives discovery of antibiotics has been one of the important achievements of mankind in the field of infectious diseases, although after a short time, the phenomenon of antibiotic resistance was created. nowadays, there is a need for an innovation in the control of microbial infections such as the use of antimicrobial peptides. these peptides are abundantly found in neutrophils and since leukoreduction filters are a valuable source of these cells, it has been studied as an available option.materials and methods in this experimental study, leukoreduction filters was selected by easy non-probability sampling method. first, leukocytes were extracted from leukoreduction filters and then neutrophils were isolated. defensin peptide was extracted after sonication of neutrophils and was purified by hplc. staphylococcus aureus bacteria was cultured and the amount of bacterial inoculation was determined and the minimum inhibitory concentration was measured by macrodilution method. microbial inhibition halo diameter size of defensin was determined for the intended bacteria. results using defensin standard, purified defensin peak was collected and the minimum inhibitory concentration was determined as 2.5 μg/ml on staphylococcus aureus by macrodilution method. microbial inhibition halo diameter size was calculated as 9 mm.conclusions the treatment of infectious diseases has faced a challenge with the widespread emergence of drug resistance, and the use of new innovations is inevitable. defensin as an antimicrobial peptide is a suitable option that is abundantly found in neutrophils obtained from leukoreduction filters and is suggested for research on new antimicrobial drugs.