شرایط محلول‌سازی گلبول قرمز متراکم جهت دستیابی به آنتی‌ژن duffy a در آزمایشگاه

سابقه و هدف یکی از آنتی‌‌ژن‌های فرعی گروه خونی،duffy  می‌باشد که شامل زیرگروه‌های مختلف است. سیستم گروه خونی duffy ، از نظر انتقال خون، از اهمیت بالینی برخوردار است، لذا شناسایی دقیق این آنتی‌ژن اهمیت به‌ سزایی دارد. دراین مطالعه، فرآیند محلول‌سازی غشای گلبول قرمز و خالص‌سازی آنتی‌ژن بررسی شد.مواد و روش‌هادر این مطالعه تجربی، کیسه گلبول قرمز متراکم با ویژگی o- و fya+ از پایگاه انتقال خون استان تهران، تهیه شده و با به کارگیری دترژانت nonidet p-40، اقدام به محلول‌سازی غشای آن‌ها شد. در مرحله بعد، آنتی‌ژن fya با استفاده از روش کروماتوگرافی تمایلی و به کارگیری آنتی‌بادی اختصاصی این آنتی‌ژن خالص‌سازی شد. ویژگی پروتئین خالص شده با روشelisa  بررسی شد.یافته‌هاویژگی fya+ در گلبول‌های قرمز کیسه rbc با روش آگلوتیناسیون تایید شد. به علاوه، ویژگی آنتی‌ژن تخلیص شده از کیسه یاد شده، با روش‌ elisa تایید شد. جذب نوریod 450 nm  آنتی‌ژن تخلیص شده در روش elisa با آنتی‌بادی‌های fya و fyb، به ترتیب 0.137 ± 1.056 و 0.016 ± 0.197 (2 n=) بود. نتیجه گیریجهت دستیابی به آنتی‌ژن fya، محلول‌سازی غشای گلبول قرمز با استفاده از دترژانت غیر یونی  nonidet p-40، قابل انجام بوده و می‌توان در مطالعه‌های بعدی از آنتی‌ژن به دست آمده، در زمینه‌های مختلف از جمله ایمنی‌زایی و تولید آنتی‌بادی بهره برد. 

investigating the solubilization conditions of packed red blood cells to obtain duffy a antigen in the laboratory

background and objectivesone of the antigens of the blood group is duffy, which includes different subtypes. this system is of clinical importance in terms of blood transfusion, so accurate identification of this antigen is very important. in this study, the process of solubilization of red blood rbc membrane and purification of the duffy antigen, were investigated.materials and methodsin this experimental study, packed rbcs (o- and fya+) were obtained from the blood donation center of tehran province. the membranes of rbcs were solubilized using nonidet p-40 detergent. in the next step, fya antigen was purified by affinity chromatography method using a specific antibody against this antigen. the specificity of the purified protein was tested by elisa technique.resultsthe fya+ characteristic of red blood cells of the rbc bag was confirmed. in addition, the specificity of the antigen was confirmed by elisa method. the absorbance levels of the purified antigen (od450nm) in elisa method were 1.056 ± 0.137 and 0.197 ± 0.016 by employing the fya and fyb antibodies, respectively.conclusions  the present research showed that red blood cell membrane solubilization can be done to purify fy antigen and this antigen may be used in various fields including immunization and antibody production.