مقایسه اثر لیزات پلاکتی مشتق از خون محیطی و خون بند ناف بر تکثیر و تمایز سلول‌های مزانشیمال

سابقه و هدف تکثیر و تمایز سلول‌های بنیادی مزانشیمی(msc) در محیط کشت، مستلزم حضور مکمل های مغذی همانند سرم جنین گاوی(fbs) می باشد که خطر ابتلا به پریون ها یا عفونت های زئوتیک را افزایش می دهد. لیزات پلاکتی به عنوان یک منبع غنی از فاکتورهای رشد و سیتوکاین ها می‌تواند جایگزین fbs در محیط کشت سلولی باشد. هدف مطالعه، مقایسه اثر لیزات پلاکتی خون بند ناف و خون محیطی بر تکثیر و تمایز mscs بود.مواد و روش‌ها در این مطالعه تجربی، mscs انسانی از بافت جفت جدا و با روش فلوسیتومتری تایید هویت شدند. 3 کیسه پلاکتی جمع آوری و لیزات پلاکتی به روش تکرار انجماد/ ذوب تهیه شد. mscs در محیط های متفاوت کشت و برای ارزیابی ظرفیت تمایز، در محیط های تمایز استخوان سازی و چربی کشت و با رنگ آمیزی اختصاصی آلیزارین رد و oil red-o بررسی شدند. میزان tgf-β به روش الایزا ارزیابی شد. تحلیل آماری با استفاده از  22 spss و آزمون one-way anova انجام شد. یافته‌ها میزان تکثیر mscs در محیط های حاوی لیزات پلاکتی خون محیطی یا بند ناف تفاوت معناداری با محیط حاوی 5% fbs نداشت. میزان تکثیر در محیط حاوی cbl و سرم خون بند ناف تفاوت معناداری با محیط حاوی10% fbs نداشت و توانایی تمایز mscs به سلول های استخوانی و سلول های چربی در محیط‌های حاوی cbl یا pbl به خوبی حفظ شده بود.نتیجه گیری لیزات پلاکتی می تواند جایگزین مناسبی برای سرم حیوانی در محیط کشت سلول باشد. این عوامل علاوه ‌بر رشد و تکثیر سلول‌های مزانشیمی، توانایی تمایز به استئوسیت و آدیپوسیت را در محیط های حاوی این عوامل به خوبی حفظ می نماید.

comparison of the effect of platelet lysate derived from umbilical cord blood and peripheral blood on the expansion and differentiation of mscs

abstractbackground and objectivesproliferation and differentiation of mesenchymal stem cells (mscs) in culture media requires the presence of nutrient supplements such as bovine fetal serum (fbs), which increases the risk of prion/xenotic infections. platelet lysates as a rich source of growth factors and cytokines can replace fbs in cell culture medium. this study aimed to compare the effect of platelet lysates derived from cord blood and peripheral blood on the proliferation and differentiation of mscs. materials and methodsin this experimental study, human mscs were isolated from placental tissue and identified by flow-cytometry. 3 three platelet bags were collected and platelet lysates were prepared by repeated freezing/thawing method. mscs were cultured in different media and evaluated for their differentiation capacity, cultured in osteogenic and adipogenic differentiation media with alizarin red and oil red-o staining. tgf-β levels were assessed by elisa. statistical analysis was performed using spss22 software and one-way anova statistical test. resultsthe proliferation rate of mscs in media containing cord/peripheral blood lysate (cbl or pbl) was not significantly different from that of media containing 5% fbs. also, the rate of proliferation in the medium containing cbl plus cord blood serum was not significantly different from the medium containing 10% fbs. also, the ability of mscs’ differentiation into osteocytes and adipocytes in media containing cbl or pbl was well preserved. conclusions  platelet lysates can be a suitable alternative to animal serum in cell culture medium. in addition to the growth and proliferation of mscs, these factors maintain the ability to differentiate into osteocytes and adipocytes in environments containing these factors.