ایجاد رده سلولی لنفوبلاستوئید تولیدکننده anti-rhe با استفاده از خون بیماران تالاسمی آلوایمیون

سابقه و هدف یکی از کاربردهای ویروس اپشتاین بار در تحقیقات، نامیراسازی لنفوسیت‌های b و ایجاد رده سلولی لنفوبلاستوئید می‌باشد. افراد مبتلا به تالاسمی معمولاً نیازمند تزریق خون هستند که عارضه اصلی آن آلوایمیونیزاسیون است. آنتی‌بادی علیه آنتی‌ژن rhe سبب واکنش‌های همولیتیک می‌گردد. هدف از این مطالعه، ایجاد رده سلولی لنفوبلاستوئید تولیدکننده آنتی‌e با استفاده از سلول‌های تک هسته‌ای خون محیطی بیماران تالاسمی آلوایمن علیه آنتی‌ژن e در مواجهه با ویروس ebv بود.مواد و روش‌هادر یک مطالعه تجربی، سلول‌های تک هسته‌ای 3 بیمار توسط فایکول جدا و با ebv مجاور گردید. سلول‌های ترانسفرم شده در محیط کشت  rpmiحاوی سیکلوسپورین کشت داده شدند. پس از 3-2 هفته، تشکیل کلون در چاهک‌ها بررسی و آزمایش هماگلوتیناسیون برای چاهک‌ها انجام شد؛ میزان کل آنتی‌بادی چاهک‌های مثبت به روش الایزا اندازه‌گیری گردید.یافته‌هامواجهه  سلول‌های تک هسته‌ای بیماران با ebv منجر به ترانسفورم سلول‌ها و ایجاد کلون در برخی از چاهک‌ها گردید. نتایج هماگلوتیناسیون و الایزا نشان داد که کلون‌ها قادر به تولید آنتی‌بادی ضد آنتی‌ژن rhe هستند.نتیجه گیریمی‌توان با استفاده از سلول‌های حساس شده بیماران تالاسمی علیه آنتی‌ژن rhe و نامیراسازی آن به روش ترانسفورماسیون به کمک ویروس ebv ، رده سلولی لنفوبلاستوئید تولیدکننده آنتی‌بادی anti-e ایجاد کرد. 

Establishment of lymphoblastoid cell line producing Anti-RhE antibody using alloimmune thalassemia patient's blood

AbstractBackground and ObjectivesOne of the applications of Epstein-Barr virus in research is the immortalization of B lymphocytes and the creation of the lymphoblastoid cell line. People with thalassemia usually need blood transfusion, the main complication of which is alloimmunization. Antibody against RhE antigen causes hemolytic reactions. The aim of this study is to create a lymphoblastoid cell line that produces anti-E using peripheral blood mononuclear cells of alloimmune thalassemia patients against E antigen when exposed to Epstein Bar Virus (EBV).Materials and MethodsIn an experimental study, the mononuclear cells of 3 patients were isolated by Ficol and mixed with EBV. The transformed cells were cultured in RPMI medium containing cyclosporine. After 2-3 weeks, the formation of clones in the wells was checked and the hemagglutination test was performed for the wells containing the growing cells; the total amount of antibody in positive wells was measured by ELISA method.ResultsExposure of mononuclear cells of patients with EBV led to cell transformation and creation of clones in some wells. The results of hemagglutination and ELISA methods showed that the clones were able to produce antibodies against the RhE antigen.Conclusions  Anti-E antibody-producing lymphoblastoid cell line can be created by using sensitized cells of thalassemia patients against RhE antigen and its immortalization by EBV transformation method.