اثر آپوپتوتیک و آنتی‌پرولیفراتیو فرکشن های گیاه juniperus excelsa بر روی رده سلولی لوسمی لنفوبلاستیک حاد(nalm-6)

سابقه و هدف لوسمی لنفوبلاستی حاد، از بدخیمی های خونی رده لنفوئیدی می باشد. عوارض جانبی داروهای شیمی‌ درمانی که از ابتدا در درمان سرطان مورد توجه بودند، علت گرایش به سمت داروهای گیاهی بودند. مطالعه‌های گذشته بر روی گیاه جونیپروس اکسلسا حاکی از وجود خاصیت ضد سرطانی بر روی برخی رده‌های سلولی سرطانی بود. هدف از این مطالعه، بررسی اثرات کشندگی و انتخاب فرکشن توکسیک ترگیاه جونیپروس اکسلسا بر روی رده سلولی all (nalm-6) و سلول های طبیعی pbmc بود.مواد و روش‌ها در یک مطالعه تجربی، میزان سیتوتوکسیسیتی فرکشن ها از طریق آزمون های زنده‌مانی سلولی و فعالیت متابولیک ارزیابی شد. با استفاده از این دو آزمون، فرکشن توکسیک تر انتخاب گشته و سپس میزان آپوپتوز سلولی به روش رنگ‌آمیزی آنکسین v و پروپیدیوم یدید به کمک فلوسیتومتری برای آن محاسبه شد. هر آزمون سه بار تکرار گردید. از آزمون one-way anova و 23 spss  برای آنالیز آماری داده ها استفاده شد.یافته‌ها یافته ها نشان داد که دوز µg/ml 2.5 و µg/ml 4 به ترتیب فرکشن کلروفرمی و اتردوپترولی گیاه جونیپروس، بدون تاثیر معنادار بر سلول‌های pbmc ، درصد زنده‌مانی و فعالیت متابولیک سلول های nalm-6 را به طور معنادار کاهش داد(0.01>p). فرکشن آبی آن فاقد اثرات سیتوتوکسیک بود. با این آزمون ها، فرکشن توکسیک تر کلروفرمی انتخاب شد. آپوپتوز سلول های nalm-6 با فرکشن کلروفرمی توسط فلوسیتومتری، افزایش حدود 13 برابری در مقایسه با گروه تیمار نشده نشان داد(0.001>p).نتیجه گیری نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد فرکشن کلروفرمی و اتردوپترولی گیاه جونیپروس، دارای خاصیت کشندگی و آنتی‌پرولیفراتیو بوده و سلول های nalm-6 را وارد چرخه آپوپتوز می کند.

Investigating the apoptotic and anti-proliferative effects of Juniperus excelsa fractions on Acute Lymphoblastic leukemia cell line (Nalm-6)

AbstractBackground and ObjectivesAcute lymphoblastic leukemia is a hematological malignancy of lymphoid lineage. Side effects of chemotherapy drugs is a major reason for the tendency to use Herbal medicines. Previous studies on Juniperus excelsa (J.excelsa) have shown anti-cancer properties on some cancer cell lines. This study aimed to investigate the effect of three fractions of J.excelsa on acute lymphoblastic leukemia cells (Nalm-6) and normal mononuclear cells (PBMC), and find a more toxic fraction. Materials and MethodsIn this experimental study, the cytotoxic activity of these fractions in Nalm-6 was determined using Viability and MTT assay. By these tests, the more toxic fraction was selected and apoptosis was assessed and confirmed with Annexin-V/propidium iodide staining by flow cytometry. Each test was repeated at least three times. Statistical analysis was assessed by one-way ANOVA and SPSS 23. ResultsThe results showed that concentrations of 2.5 and 4 µg/ml of chloroform and etherdopetrol fractions of J.excelsa, without considerable effect on PBMC (p > 0.05), reduced significantly the cell viability and metabolic activity of Nalm-6 (p < 0.01). Also, aquae fraction had no cytotoxic effect on Nalm-6 and normal cells (p > 0.05). The more toxic fraction, which was chloroform fraction, was selected by these tests. According to the flow cytometry test, treated Nalm-6 cells with chloroform fraction demonstrated a 13-fold increase in the number of apoptotic cells compared with control (p < 0.001). Conclusions  Our study showed that chloroform and etherdopetrol fractions have cytotoxic and antiproliferative effects on leukemic cells (Nalm-6) and induce apoptosis.