تکثیر سلول‌های لنفوسیتی آلوایمن در حضور کشت مخلوط لنفوسیتی و سیکلوسپورین

سابقه و هدف کشت لنفوسیتی مخلوط ((mlc جهت مطالعه میانکنش بین جمعیت‌های لنفوسیتی و ترکیبات ناشی از این میانکنش‌ها به کار می‌رود. تکثیر لنفوسیت‌ها در محیط mlc، به علت ترشح سیتوکاین‌ها در این محیط افزایش می‌یابد. سیکلوسپورین a به عنوان مهارکننده سیستم ایمنی به کار می‌رود. تزریق مکرر خون، باعث آلوایمیونیزاسیون لنفوسیت‌های b می‌گردد. یکی از روش‌های تولید آنتی‌بادی، نامیراسازی لنفوسیت‌های b می‌باشد. سیتوکاین‌ها با افزایش تکثیر لنفوسیت b به نامیراسازی کمک می‌کنند. با توجه به نقش mlc در تولید سیتوکاین، هدف این مطالعه، تولید mlc و بررسی آن در تکثیر سلول‌های آلوایمن در حضور و عدم حضور سیکلوسپورین بود. مواد و روش‌هادر یک مطالعه تجربی، لنفوسیت‌های خون محیطی دو فرد که یکی حاوی آنتی‌ژن rhd و دیگری فاقد آن بود با روش فایکول جداسازی و جهت تولید mlc در معرض هم قرار گرفتند. اثرmlc تولیدی و سیکلوسپورین بر تکثیر لنفوسیت‌های آلوایمن با میکروسکوپ و رنگ‌آمیزی تریپان‌بلو بررسی شد و نتایج با نرم‌افزار prism و مقایسه میانگین‌ها با آزمون ttest جفت شده بررسی گردید(0.05>p). یافته‌هاmlc و سیکلوسپورین باعث افزایش تکثیر لنفوسیت‌ها با میانگین و انحراف معیار197989.8 ± 440000 در مقایسه با کنترل 84852.8 ± 160000 گردیدند. نتیجه گیریmlc و سیکلوسپورین به تکثیر سلول‌های لنفوسیتی کمک می‌کنند. با تایید آزمایش‌های تکمیلی،mlc و سیکلوسپورین می‌توانند در تکثیر لنفوسیت‌های b به عنوان یکی از گروه‌های سلولی لنفوسیتی، جهت تولید آنتی‌بادی موثر واقع گردند.

Alloimmune lymphocytes proliferation in presence of Mixed Lymphocyte Culture and cyclosporine

AbstractBackground and ObjectivesMixed Lymphocytes Culture (MLC), is a method studies the cellcell interaction between subpopulations of lymphocytes and the production of compounds caused by this interaction. MLC as a source of cytokines can increase B lymphocytes proliferation. Repeated blood transfusions cause B lymphocytes alloimmunization. Cyclosporin A has inhibitory effect on immune system. In alloimmunization, stimulated B lymphocytes can produce antibodies against exposed foreign red blood cell antigens. Immortalization of B lymphocytes can lead to continuous production of monoclonal antibodies. Considering MLC as an important source of cytokines and the presence of B lymphocytes as a group of cells in peripheral blood cells, the aim of this study was to produce MLC and evaluate its effect on proliferation of alloimmune peripheral blood cells in the presence or absence of cyclosporine A using microscopic evaluation and dye exclusion staining method. Materials and MethodsIn an experimental study, RhD antigen positive and negative lymphocytes were exposed together for MLC production. Peripheral blood lymphocytes resulted from two alloimmunized patients was treated with MLC and cyclosporine, and their proliferation was analyzed compared to the control group using microscopy and trypan blue staining method. The results were analyzed by ttest using prism software (p< 0.05). ResultsMLC and cyclosporine increased proliferation of lymphocytes with mean value being 440000 (SD: 197989.8) vs 160000 (SD: 84852.8) of control group. Conclusions MLC and cyclosporine increase lymphocyte cells proliferation. By confirmation of additional experiments, MLC and cyclosporine may be used as effective agents in lymphocyte proliferation and antibody production of alloimmune B lymphocytes.