مقایسه آزمایش‌های الکتروکمی لومینسانس، وسترن بلات و pcr برای تائید ویروس htlv-1 در داوطلبان اهدای خون

سابقه و هدف ویروس لنفوتروپیک سلول t انسانی نوعi ، با دو بیماری در انسان یعنی لوکمی/لنفوم t بزرگسالان و پاراپارسیس اسپاستیک گرمسیری مرتبط است. حدود 5 تا 10 میلیون نفر با htlv1 در سراسر جهان آلوده شده‌اند. به منظور افزایش سلامت خون در گیرندگان و جلوگیری از نتایج کاذب در داوطلبان اهدای خون، نیاز است روش‌های شناسایی عوامل عفونی، از حساسیت و اختصاصیت بالا برخوردار باشند. هدف از این مطالعه؛ مقایسه آزمایش‌های الکتروکمی لومینسانس، وسترن بلاتینگ و pcr ، برای تائید ویروس htlv1 بود.مواد و روش‌هااین مطالعه تجربی در سال 1397 بر روی تعداد 66 نمونه(62 مرد و 4 زن) که با کیت الایزا دارای آنتی‌بادی علیه ویروس htlv1بودند و با روش‌های الکتروکمی لومینسانس و وسترن بلات آزمایش شدند، انجام شد. هم‌چنین جهت تشخیص ویروس با روش pcr ، اهداکنندگان خون مجدد فراخوان شدند و نمونه جدید از آنان اخذ شد. پس از استخراج dna ، آزمایش nested pcr با آغازگرهای هر دو ناحیه tax و ltr انجام شد. یافته‌هادر این مطالعه تعداد 8 (12.1%) نمونه از 66 نمونه که با آزمایش الایزا، مجدداً واکنش نشان داده بودند، انتخاب شدند. تعداد 4 (6%) نمونه با روش الکتروکمی لومینسانس، حاوی آنتی‌بادی علیه htlv1 بودند. در بررسی با روش‌های وسترن بلات و nested pcr نیز، همان 4 (6%) نمونه مجدد مثبت شدند.نتیجه گیریاستفاده از آزمایش‌های الکتروکمی لومینسانس، وسترن بلات و روش pcrکه در این مطالعه نتایج مشابهی داشتند، برای تایید ویروس htlv1 مناسب می‌باشند.

Comparison of Western blotting and PCR assays for confirmation of HTLV-1 virus in volunteer blood donors

AbstractBackground and ObjectivesHuman Tcell lymphotropic virus type I (HTLVI) has been associated with two diseases in humans such as adult Tcell leukemia/lymphoma (ATLL) and HTLVassociated myelopathy/tropical spastic Para paresis (HAM/TSP). About 5 to 10 million people are infected with HTLV1 worldwide. In order to improve the blood safety and to prevent false positive results in blood donors, methods for identifying infectious agents need to be highly sensitive and specific. The purpose of this study was to compare the electrochemical luminescence, western blotting, and PCR assays to confirm HTLV1 virus. Materials and MethodsThis exprimental study was carried out in 2018 on 66 samples (62 males and 4 females) which had antibody against HTLV1 virus. All retested samples with the same ELISA kit were examined by electrochemical luminescence and western blotting. For virus detection by PCR method, blood donors were recalled for new samples. After DNA extraction, nested PCR was performed with primers in both TAX and LTR regions. ResultsIn this study 8 (%12/1) samples from 66 samples were reacted with ELISA test. Also 4 (%6) samples had antibody against HTLV1 by electrochemiluminescence test. Finally, four samples were confirmed by Western blotting and Nested PCR. Conclusions The use of the electrochemical luminescence, western blotting and PCR assays, which had similar results in this study, is suitable for detection and confirmation of HTLV1 virus.