سطح میکروRna های Mir-222 ، Mir-92a و Mir-223 در میکروپارتیکل‌های مشتق شده از پلاکت در فرآورده‌های پلاکتی تهیه شده به روش پلاسمای غنی از پلاکت در طول مدت ذخیره‌سازی

سابقه و هدف سنجش تغییرات بیان میکرو rnaهای پلاکتی، یکی از شاخص‌های ارزیابی ضایعات ناشی از ذخیره‌سازی پلاکت محسوب می‌شود. هدف از مطالعه، بررسی سطح تغییرات در بیان mir223 و mir92a و mir222 طی دوران ذخیره‌سازی در پلاکت‌های تهیه شده به روش پلاسمای غنی از پلاکت، به عنوان شاخصی برای ارزیابی ضایعات ذخیره‌سازی بود.مواد و روش‌هادر این مطالعه تجربی، 5 واحد کنسانتره پلاکتی تهیه شده به روش prp از اهداکنندگان خون جمع‌آوری گردید و به مدت 5 روز در دمای 22 درجه سانتی‌گراد همراه با آژیتاسیون نگهداری شد. تغییرات در سطح بیان mir223 ، mir92a و mir222 با استفاده از روش qrt pcr طی روزهای صفر، سه و پنج ذخیره‌سازی اندازه‌گیری شد. نتایج با استفاده از نرم‌افزار genex نسخه 7 با آزمون pairedsample ttest تجزیه و تحلیل گردید.یافته‌هاطی این مطالعه مشخص شد بیان mir223 در روزهای سوم و پنجم ذخیره‌سازی نسبت به روز صفر افزایش یافت(001/0 p<). بیان mir92a نیز در روز سوم و پنجم نسبت به روز صفر نیز افزایش معناداری را نشان داد (05/0 p<). از طرفی بیان mir222 به تدریج در طول مدت زمان ذخیره‌سازی طی پنج روز کاهش یافت(05/0 p< ).نتیجه گیریمطالعه نشان داد که تعیین پروفایل mirna های میکروپارتیکل‌ها در کنسانتره های پلاکتی در کنار پارامترهای رایج مانند شمارش پلاکت‌ها، تعیین mpv و حجم فرآورده پلاکتی، شمارش لکوسیت‌ها، بررسی swirling و تعیین ph فرآورده پلاکتی می تواند ابزار مفیدی برای شناسایی آسیب های سلولی مرتبط با ضایعات ذخیره‌سازی پلاکت و شاخص بالقوه ای برای ارزیابی کیفیت و قابلیت زیستی پلاکت های ذخیره شده در in vitro باشد.

Evaluation of microRNAs; mir223, mir222 and mir92a levels in the Platelet-derived microparticles in the Platelet concentrates produced by Platelet Rich Plasma method during storage

AbstractBackground and ObjectivesPlatelets release microparticles containing cellular components, including microRNAs, during storage. Assessment of these microRNAs is one of the markers for evaluation of platelet storage lesions. The aim of the present study was to evaluate the level of changes in the expression of mir223, mir92a and mir222 during storage in platelets prepared by platelet rich plasma method. Materials and MethodsIn this experimental study, 5 platelet concentrates prepared by PRP method were collected from blood donors and stored at 22 °C for 5 days with agitation. Changes in the expression levels of mir223, mir92a and mir222 were determined using qRT PCR method on days zero, three and five of storage. The results were analyzed using pairedsampleT test using GenEX version 7 software. ResultsIt was found that the expression of miR223 gradually increased during the third and fifth days compared to the day 0 of platelet concentrate storage (p < 0.05). The expression of mir92a also significantly increased on the third and the fifth days compared to day 0 of storage (p < 0.05). However, the expression of mir222 gradually decreased over the fifth day of storage (p < 0.05). Conclusions This study showed that the determination of miRNAs in the plateletderived microparticles with common markers such as platelet count, MPV determination, platelet volume determination, leukocyte count, swirling assay, and pH measurement can be useful tools for identifying cellular damage associated with platelet storage lesion and maybe potential indicators for evaluating the quality and viability of platelets stored in vitro conditions.