اثر مهارکننده تلومراز mst-312 بر آپوپتوز سلول‌های میلومی u266

سابقه و هدف تلومراز در اکثر سرطان های انسانی و میلوم مالتیپل بیان می شود و با توجه به عدم بیان آن در سلول های سوماتیک، هدف قرار دادن آن یک رویکرد درمانی موثر برای درمان سرطان می باشد. هدف از مطالعه ،بررسی تاثیر مهارکننده تلومراز mst-312 ،بر آپوپتوز سلول میلومی u266 بود.مواد و روش ها در یک مطالعه تجربی، سلول های u266 با دوزهای مختلف mst-312 در زمان های مختلف تیمار شدند، سپس زنده مانی سلولی با آزمون دفع رنگ تریپان بلو، فعالیت متابولیک سلول با روش رنگ سنجی mtt و آپوپتوز سلولی به روش فلوسایتومتری با استفاده از اتصال به آنکسینv /7aad بررسی گردید. آپوپتوز در سطح ژن نیز با بررسی بیان ژن های bax و bcl2 بعد از تیمار سلول ها با دارو و استخراج rna با real time pcr انجام گرفت.یافته ها بیش از 50% کاهش در زنده مانی سلول های تیمار شده در غلظت 8 میکرومولار به مدت 48 ساعت مشاهده شد. فعالیت متابولیک سلول بعد از تیمار 48 ساعته با دوز های 2، 4 و 8 میکرومولار mst-312 به ترتیب 25%، 46% و 62% کاهش یافت. تقریباً30 % افزایش آپوپتوز در سلول های u266 بعد از مواجهه 48 ساعته با 2 میکرومولار mst-312 مشاهده شد. تیمار سلول های میلومی با غلظت 2 میکرومولارmst312 به مدت 48 ساعت، باعث افزایش بیان ژن bax و کاهش بیان ژن bcl2 گردید. نتیجه گیریتیمار کوتاه مدت سلول های سرطانی میلومی با mst-312 باعث کاهش زنده مانی و فعالیت متابولیک و افزایش آپوپتوز سلولی می شود. این دارو با مهار تلومراز و القای آپوپتوز در سلول های میلومی می تواند به عنوان کاندیدی جهت درمان میلوم مالتیپل پیشنهاد شود.

Investigation of telomerase inhibition effect on apoptosis of myeloma cell line U266

AbstractBackground and ObjectivesTelomerasetargeted therapy for cancer has received great attention because telomerase is expressed in almost all cancer cells but is inactive in most normal somatic cells. This study aimed to investigate the effects of telomerase inhibitor MST312, a chemically modified derivative of epigallocatechin gallate (EGCG), on apoptosis of myeloma cell line U266. Materials and MethodsIn an Experimental study, U266 cells were treated with different concentrations of MST312 at different times; then, cell viability by trypan blue exclusion assay, cell metabolic activity by MTT assay, and cell apoptosis by Annexin V Apoptosis Detection Kit were measured. To further investigate apoptosis, BAX and BCL2 gene expression of the treated cells was investigated by the quantitative RealTime PCR. ResultsMST312 exerted a dosedependent shortterm cytotoxic effect on myeloma cells. Over 50% decrease in the viability of treated cells was seen in 8 mu;M concentration of MST312 within 48 h. The cytotoxic effect of MST312 was concentrationdependent, with approximately 25, 46, and 62% reduction in metabolic activity after 48 h exposure to 2, 4, and 8 mu;M of MST312, respectively. Gene expression analysis showed downregulation of antiapoptotic gene Bcl2 and upregulation of apoptopic gene BAX. Conclusions Inhibition of telomerase activity by MST312 represents a novel treatment strategy for Multiple Myeloma cancer.