توسعه سلول‌های بنیادی cd34+ خون بند ناف در داربست dbm تحت تاثیر نیکوتین آمید

سابقه و هدف تعداد کم سلول های بنیادی خونساز در خون بند ناف، مانعی مهم برای پیوند موفقیت آمیز این سلول ها بوده و ازدیاد این سلول ها در کنار حفظ خصوصیات عملکردی آن ها، از اهمیت بالایی برخوردار است. کشت سلول ها بر روی داربست های سه بعدی، کمک بسیاری به شبیه سازی ریز محیط مکانیکی و شیمیایی بافت مغز استخوان کرده و استفاده از ترکیبات خاصی چون نیکوتین آمید به تکثیر بدون تمایز سلول ها کمک می کند. به این ترتیب در این مطالعه به منظور تکثیر با حداقل تمایز سلول های بنیادی خونساز، توسعه این سلول ها در محیطی نزدیک به مغز استخوان طبیعی در حضور نیکوتین آمید بررسی شد. مواد و روش هادر این مطالعه تجربی، سلول های بنیادی خونساز در 5 بار تجربه در محیط سه بعدی و در شرایط مختلف تحت تاثیر سایتوکاین ها و نیکوتین آمید به مدت 7 روز کشت داده شدند. در نهایت به منظور بررسی میزان توسعه سلولی، شمارش تام سلولی، ایمونوفنوتیپ سلولی و سنجش آپوپتوز به روش فلوسیتومتری و هم چنین بررسی توانایی کلنی زایی سلول ها انجام شد. نتایج توسط آزمون آنوا بررسی شد. یافته هانتایج این مطالعه حکایت از تکثیر بیشتر در تعداد کل سلول ها و سلول های cd34+، میزان کمتر آپوپتوز و توانایی کلنی زایی بالاتر در موارد استفاده توام از سایتوکاین ها و نیکوتین آمید در داربست سه بعدی نسبت به گروه های دیگر داشت.نتیجه گیرینیکوتین آمید با ممانعت از ایجاد تغییرات اپی ژنتیکی حاصل از کشت در محیط آزمایشگاه و داربست سه بعدی با شبیه سازی ریز محیط مغز استخوان، ترکیب بسیار مناسبی برای توسعه این سلول ها به شمار می آیند.

The investigation of CD34+cord blood stem cells expansion in DBM scaffold under the influence of nicotinamide

AbstractBackground and ObjectivesThe low number of umbilical cord blood cells is an important barrier to successful bone marrow transplantation. Therefore, the growth of these cells while maintaining their functional characteristics is of great importance. Culturing cells on 3D scaffolds like DBM has greatly contributed to the simulation of the mechanical and chemical microenvironment of the bone marrow tissue. There are also specific compounds for proliferation without differentiation of cells one of which is nicotinamide. Materials and MethodsIn this experimental study, hematopoietic stem cells (HSCs) were cultured 7 days in DBM under the following conditions of (1) negative control, (2) cytokine, (3) nicotinamide, (4) nicotinamide and cytokine. After 7 days, cell count, purity using flow cytometry, colony forming unit assay and apoptosis were evaluated and performed. The data were analyzed using Anova. ResultsOur results indicated that in all cases, the combination of nicotinamide and cytokine was accompanied with more proliferation, more CD34+ cells, less apoptosis, and higher colonyforming ability than other groups. Conclusions Nicotinamide is a very suitable compound for the development of umbilical cord blood cells given the role of the former in preventing epigenetic changes that are the outcome of laboratorial cell culture and the simulation of bone marrow niche by DMB.