تنظیم افزایشی mir-155 باعث القای توقف چرخه سلولی و آپوپتوز در لوسمی میلوئیدی مزمن می‌گردد

زمینه و هدف: بر اساس شواهد روزافزون، بیان غیر‌طبیعی microrna ها با تومورزایی، گسترش تومور و عود در لوسمی‌ها، از جمله لوسمی میلوئید مزمن (cml) مرتبط هستند. در این مطالعه اثر بیان بیش از حد mir-155 در سلول‌های k562 بر توقف چرخه سلولی و القا آپوپتوز بررسی گردید.روش تحقیق: در این مطالعه بنیادی کاربردی، وکتورplenti-iii-pre mir-155-gfp برای افزایش بیان mir-155 در رده سلولی k562 از طریق نوکلئوفکشن در مقایسه با وکتور plenti-iii - backbone-gfp به‌عنوان گروه کنترل (backbone) مورداستفاده گرفت. از فلوسایتومتری برای تایید بیان وکتور حاوی mir-155 در سلول‌های آسیب‌دیده استفاده شد. پس از ترانسفکشن، میزان بیان mir-155، bax، bcl2، casp3 و tp53 با روش rt-qpcr اندازه‌گیری شد. در بررسی چرخه سلولی از رنگ پروپیدیوم یدید propidium iodide (pi) استفاده گردید و سلول‌های رنگ‌آمیزی شده توسط فلوسایتومتری قرائت شدند. اهمیت آماری نیز به عنوان مقدار p کمتر از 05/0تعریف شد.یافته‌ها: پس از تایید افزایش بیان mir-155، هنگامی که سلول‌های ترانسفکت‌شده با mir-155 با سلول‌های ترانسفکت‌شده با backbone، شدند، توقف چرخه سلولی در گروه mir-155 مشاهده شد. در سلول‌های با افزایش بیان mir-155، تغییر در نسبت‌های g0/s و g1/s در مقایسه با backbone به ترتیب به 5/7 و 5/4 نشان داده شد. 48 ساعت پس از ترانسفکشن، بیان ژن‌های tp53، bax و casp3 در گروه بیان کننده mir-155 افزایش و بیان bcl2 کاهش یافت.نتیجه‌گیری: افزایش سطح mir-155 باعث توقف چرخه سلولی و افزایش سطح بیان ژن پرو آپوپتوز می‌شود که نشان می‌دهد mir-155 رشد تومور را در cml مهار می‌کند.

upregulation of mir-155 induces cell cycle arrest and apoptosis in chronic myeloid leukemia

background and aims: according to the increasing evidence, abnormal expression of micrornas is associated with tumorigenesis, tumor spread, and relapse in leukemias, including chronic myeloid leukemia (cml). the present study aimed to investigate the effect of mir-155 overexpression in k562 cells on cell cycle arrest and apoptosis induction.materials and methods: the plenti-iii-pre mir-155-gfp vector was used to increase mir-155 expression in the k562 cell line through nucleofection compared to the plenti-iii-backbone-gfp vector as a control group (backbone). the flow cytometry method was employed to confirm the expression of the vector containing mir-155 in damaged cells. after transfection, the expression levels of mir-155, bax, bcl2, casp3, and tp53 were measured by the rt-qpcr method. the propidium iodide (pi) dye was used to study the cell cycle, and the stained cells were read by flow cytometry. the statistical significance was also defined as a p-value less than 0.05.results: after confirming the increase in mir-155 expression when cells transfected with mir-155 were compared with cells transfected with backbone, cell cycle arrest was observed in the mir-155 group. in the cells with increased expression of mir-155, the change in g0/s and g1/s ratios compared to backbone was shown to be 7.5 and 4.5, respectively (p<0.05). moreover, 48 hours after transfection and in the group expressing mir-155, the expression of tp53, bax, and casp3 genes increased, and the expression of bcl2 decreased (p<0.05).conclusion: the increase in the level of mir-155 caused cell cycle arrest and increased pro-apoptotic gene expression, which indicates that mir-155 inhibits tumor growth in cml.