|
|
|
|
بیان و تخلیص پروتیین نوترکیب ژن سنتتیک زنجیره HC تتانوتوکسین در سیستم بیانی پروکاریوت
|
|
|
|
|
|
|
|
نویسنده
|
عارف پور Ali محمدعلی ,نظریان شهرام ,اولاد غلامرضا ,رضایی احسان ,سلیمیان جعفر
|
|
منبع
|
journal of shahrekord university of medical sciences - 1393 - دوره : 16 - شماره : 1 - صفحه:106 -113
|
|
چکیده
|
زمینه و هدف: توکسین کلستریدیوم تتانی یا تتانواسپاسمین عامل بیماری مهلک کزاز است. امروزه از توکسویید آن به عنوان واکسن استفاده می شود. تتانواسپاسمین شامل سه زنجیره l، hn و hc می باشد. زنجیره hc بخش اتصال دهنده و ایمونوژنیک آن است و به عنوان کاندیدای واکسن مطرح می باشد. هدف از این مطالعه، طراحی و تهیه ژن صناعی زنجیره hc تتانواسپاسمین، بیان و بهینه سازی آن و تخلیص پروتیین نوترکیب حاصل از آن به عنوان کاندیدای واکسن است.روش بررسی: در این مطالعه آزمایشگاهی پس از انجام مطالعات بیوانفورماتیکی و بهینه سازی ترادف ژن hc، سفارش سنتز ژن در وکتور بیانی pet28a داده شد. تایید آن به کمک هضم آنزیمی انجام شد. سپس این سازه ژنی در میزبان مناسب (e. coli bl21de3) تراریخت گردید. پس از بیان ژن و تخلیص پروتیین نوترکیب، این پروتیین با کمک وسترن بلات مورد تایید قرار گرفت.یافته ها: آنالیز بیوانفورماتیکی و مولکولی این ژن، صحت آن را تایید نمود. باند bp 1356 ژن hc در ژل آگارز و باند 50 کیلو دالتونی بیان ژن در ژل sds-page و در غشای نیترو سلولز (وسترن بلات) مشاهده شد. پروتیین نوترکیب در هر دو شکل محلول و نامحلول (اجسام توده ای شکل) تولید شده بود. این دو شکل پروتیین با هر دو روش طبیعی و دناتوره به میزان زیادی تخلیص گردید.نتیجه گیری: با توجه به مزیت های پروتیین نوترکیب hc به توکسویید کزاز به نظر می آید پروتیین نوترکیب حاصل می تواند به عنوان کاندیدای واکسن جایگزینی مناسبی برای واکسن کزاز باشد.
|
|
کلیدواژه
|
Tetanus Toxin ,Recombinant Hc chain ,Expression ,Vaccine candidate ,توکسین کزاز ,زنجیره نوترکیب HC ,بیان ,کاندید واکسن
|
|
آدرس
|
دانشگاه جامع امام حسین (ع), ایران, دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (عج), ایران, دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (عج), ایران, دانشگاه جامع امام حسین (ع), ایران, دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (عج), ایران
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Authors
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|