ارزیابی و مقایسه میزان ایمنی زایی پروتیین های نوترکیب زیر واحد اتصالی توکسین های اشرشیا کلی و بوتولینیوم تایپ A

زمینه و هدف: در میان عوامل باکتریایی، شایع ترین عامل بیماری اسهال، باکتری اشرشیاکلی انتروتوکسیژنیک است. زیر واحد ltb سم این باکتری قادر به ایجاد مصونیتی شش ماهه است. کلستریدیوم بوتولینوم نیز عامل بیماری کشنده بوتولیسم می باشد و زیر واحد bont/a-hc سم آن می تواند تا دو سال در برابر این بیماری مصونیت ایجاد کند. میزان ایمنی زایی که هر یک از این زیر واحدهای نوترکیب ایجاد می کنند، می تواند از عواملی باشد که در به وجود آمدن مصونیتی با ماندگاری متفاوت تاثیرگذار باشد. هدف از این مطالعه بررسی و مقایسه میزان تولید آنتی بادی ناشی از استفاده از دو پروتیین ltb و bont/a-hc در موش آزمایشگاهی بود.روش بررسی: در این مطالعه تجربی از باکتری bl21de3 e. coli تراریخت شده با وکتور pet28aاستفاده گردید. این وکتور حاوی ژن نوترکیب ltb اشرشیاکلی انتروتوکسیژنیک و ژن نوترکیب bont/a-hc بوتولینوم به طور جداگانه بود. پس از بهینه سازی بیان و تخلیص پروتیین نوترکیب ltb از فاز نامحلول و bont/a-hc از فاز محلول عصاره سلولی، محصولات آن ها بر روی ژلsds-page بررسی گردید. موش های آزمایشگاهی به وسیله پروتیین های حاصل، ایمنی زایی شدند. تیتر آنتی بادی حاصل از هر دو نوع پروتیین نوترکیب با استفاده از آزمون آماری t-test در نرم افزار spss ارزیابی و مورد مقایسه قرار گرفت.یافته ها: پروتیین های نوترکیب بیان شده bont/a-hc و ltb با ستون نیکل تخلیص شدند. پس از ایمنی زایی موش های آزمایشگاهی، تفاوت معناداری در تیتر آنتی بادی برای دو پروتیین bont/a-hc و ltb مشاهده گردید (01/0 > p).نتیجه گیری: اختلاف کمی بین تیتر آنتی بادی برای دو پروتیین bont/a-hc و ltb مشاهده گردید کهمی تواند به دلیل خاصیت قوی ادجوانسیتی ltbو ایمنی زایی ایجاد شده تقریباً یکسان، در فاصله زمانی محدود باشد.