ارزیابی بیان ژن هموباکس دیودنال 1 در سلول های تولید کننده انسولین، مشتق از سلول های بنیادی کارسینومای جنینی

زمینه و هدف: درک عملکرد سلول های بتا در سطح مولکولی به احتمال زیاد توسعه تکنیک های تولید سلول های بتا را تسهیل می کند. این مطالعه با هدف بررسی بیان ژن هومیوباکس دیودنال 1 (pdx-1) در سلول های تمایز یافته طراحی و اجرا شد.روش بررسی: این مطالعه بنیادی-کاربردی بر روی تمایز سلول‌های بنیادی به سلول‌های انسولین‌ساز انجام گرفت. محیط ثانویه حاصل از کشت پانکراس نوزاد یک هفته‌ای موش برای تمایز سلول‌های p19 استفاده شد. اجسام شبه جنینی (ebs) با کشت معلق 24 ساعته سلول‌های p19 تشکیل شدند. برای القای تمایز، غلظت‌های متفاوت محیط ثانویه (25%، 50%، 75% و 100%) به محیط کشت اضافه شد. جهت شناسایی سلول‌های تمایز یافته مشتق از ebs در شرایط آزمایشــگاهی از رنگ آمیزی دیتیزون استفاده شد. تولید انسولین-پروانسولین و رسپتور بتای انسولین در این سلول ها به روش ایمنوفلورسنس تعیین و بیان ژن pdx-1 به وسیله واکنش زنجیره پلی‌مراز-رونویسی معکوس ارزیابی شد. داده ها با استفاده از آزمون های آماری آنالیز واریانس یک طرفه و دانکن تجزیه و تحلیل شدند.یافته‌ها: پس از هفت روز القا، دستجات سلولی تمایز یافته ظاهر شدند. اوج پاسخ‌گویی تمایزی مربوط به غلظت 50% از محیط ثانویه بود. بیان ژن pdx-1 در دستجات سلولی تمایز یافته مشاهده شد. بیان نشانگرهای انسولین-پروانسولین و رسپتور بتا در سلول‌های تمایز یافته به روش ایمنوفلورسنس اثبات شد. نتیجه‌گیری: محیط ثانویه پانکراس باعث تمایز سلول‌های p19به سلول‌های انسولین ساز ‌‌شد، لذا نتایج این مطالعه می تواند تولید سلول های بتا را از سلول های بنیادی تسهیل نماید.