بررسی اثر سمی کروسین بر رده سلولی Mda-Mb-468 بر اساس القای آپوپتوز، و تغییرات نشانگرهای تنش شبکه اندوپلاسمی و اتوفاژی

هدف: کروسین از ترکیبات عصاره زعفران است که خواص ضد سرطانی آن‌ روی انواعی از سرطان‌ها به‌ویژه سرطان پستان در مطالعات اخیر نشان داده ‌شده است. با این حال، اطلاعات بسیار کمی از مکانیسم اثر این ترکیب موجود است. مطالعات قبلی، القای آپوپتوز در سایر سلول‌های سرطانی تحت درمان با زعفران یا کروسین را نشان داده ‌است. در این پژوهش با هدف بررسی اثر کروسین بر ردۀ سلولی mda-mb-468 سرطان پستان، در نظر است تا بیان و شکستن کاسپاز 9، پیرایش و بیان پروتئین‌ xbp1 و تجمع پروتئین lc3ii در تیمار شده با این ترکیب، بررسی شود. مواد و روش‏ها: سنجش mtt برای بررسی اثر سمی کروسین بر رده سلولی نامبرده استفاده شد. سپس پیرایش ژن‏ xbp1 در سطح mrna و بیان پروتئین پیرایش شده (xbp1s) به‌ترتیب با ‌rtpcr و وسترن بلات بررسی شد. بیان کاسپاز 9، کاسپاز شکسته شده و تجمع lc3ii نیز با روش وسترن بلات بررسی شدند. میزان بیان این پارامترها با استفاده از نرم‌افزار image j به‌صورت کمی گزارش شد. نتایج: کروسین به‌صورت وابسته به دوز و زمان، موجب مرگ رده سلولی mda-mb-468 شد. تیمار با کروسین، تغییر قابل توجهی در فعال شدن کاسپاز 9 و شکستن آن، در نتیجه افزایش نسبت cleavedcas9/cas9 داشت. پیرایش ژن xbp1 نیز پس از تیمار افزایش یافت. همچنین افزایش معنی‏دار بیان پروتئین‌ پیرایش شده xbp1 (xbp1s) و تجمع پروتئین lc3ii و افزایش نسبت lc3ii/lc3i در این سلول‏ها مشاهده شد. نتیجه‌گیری: نتایج نشان داد که این رده از سلول‏های سرطان پستان پس از تیمار با کروسین دچار آپوپتوز ‏شد. با توجه به تغییرات نشانگرهای مسیرهای upr و اتوفاژی، احتمالاً این دو مسیر نیز در پیشبرد سلول به سمت مرگ سلولی و تنظیمات درون سلولی، نقش دارند.