|
|
مقایسه دو روش متفاوت انجماد شیشهای بافت تخمدان موش نابالغ با استفاده از رنگآمیزی تریپان بلو
|
|
|
|
|
نویسنده
|
عیوض خانی فریده ,ابراهیمی بی تا ,یوسفی بهپور ,فتحی روح الله ,ثامنی حمیدرضا
|
منبع
|
پژوهش هاي آسيب شناسي زيستي - 1394 - دوره : 18 - شماره : 1 - صفحه:83 -93
|
|
|
چکیده
|
روشهای انجمادی متفاوتی برای انجماد بافت تخمدان بیماران در معرض خطر ناباروری استفاده میشود. اتیلن گلیکول، دی متیل سولفوکساید و پروپاندیول، با خاصیت تشکیل کریستالهای یخ کمتر بهعنوان محلولهای انجمادی نفوذپذیر پایهای در مقایسه با انواع دیگر توصیه شدهاست. در مطالعه حاضر آثار دو روش انجماد شیشهای متفاوت روی بافت کامل تخمدان موش نابالغ با استفاده از رنگآمیزی تریپان بلو بررسی شد.مواد و روشها: تخمدان موشهای 8 روزه نژاد nmri، پس از جداسازی در گروههای کنترل غیر انجمادی، انجمادی 1 و انجمادی 2 دستهبندی شدند. محلول انجمادی 1 از محیط پایه ?-mem، اتیلن گلیکول15 درصد، دی متیل سولفوکساید 15 درصد، سرم جنین گاوی 20 درصد و محلول انجمادی 2 از محیط پایه، اتیلن گلیکول 20 درصد، پروپاندیول 20 درصد و سرم جنین گاوی 15 درصد تشکیل شد. روشهای انجمادی1 و انجمادی 2 بهترتیب در دمای 4 درجه سانتیگراد و دمای اتاق انجام شدند. مراحل ذوب در روش انجمادی 1 با استفاده از محیط پایه، سرم جنین گاوی 20 درصد و سوکروز 1 مولار و در روش انجمادی 2 با بهرهبرداری از محیط پایه، سرم جنین گاوی 15 درصد و غلظتهای کاهشی سوکروز (1، 5/0 و 25/0 مولار) انجام شد. تخمدانها در محیط پایه و رنگ تریپان بلو 4/0 درصد بهمدت 20 دقیقه انکوبه، بهوسیله بوین تثبیت و در نهایت برشهای بافتی سریالی بعد از رنگآمیزی هماتوکسیلین و ایوزین بهوسیله میکروسکوپ نوری شمارش شد.نتایج: درصد زیادی از فولیکولهای بدوی در گروه کنترل غیر انجمادی مشاهده شد و اختلاف معنیداری (05/0 > p) بین گروه کنترل غیر انجمادی و انجمادی 1 و همچنین بین انجمادی 1 و انجمادی 2 مشاهده شد. افزایش معنیداری هم در شاخص زندهمانی هر سه دسته فولیکولی در گروه انجمادی 2 (05/0 > p) نسبت به انجمادی 1 مشاهده شد.نتیجهگیری: انجماد شیشهای با استفاده از ترکیب اتیلن گلیکول و پروپاندیول گزینه مناسبتری برای حفظ و نگهداری بافت تخمدان است و همچنین روش رنگآمیزی تریپان بلو، بهعنوان یک شیوه سریع و آسان برای ارزیابی بافت تخمدانی پیشنهاد میشود.
|
کلیدواژه
|
بافت تخمدان ,انجمادشیشهای ,تریپان بلو
|
آدرس
|
دانشگاه علوم پزشکی سمنان, ایران, پژوهشگاه رویان, ایران, دانشگاه علوم پزشکی سمنان, ایران, پژوهشگاه رویان, ایران, دانشگاه علوم پزشکی سمنان, ایران
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Authors
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|