نقش دو پروتیین FhaB1 و FhaB2 وابسته به سیستم ترشحی دو جزیی در چسبندگی اسنیتوباکتر بومانی ATCC19606 به سلول اپیتلیال انسانی

هدف: اسنیتوباکتر بومانی توانایی عجیبی برای کلونیزاسیون بر سطوح مختلف را داراست و چسبندگی روی سطوح به‏عنوان یک عامل بیماری‏زایی و اولین گام در انجام فرآیند کلونیزاسیون مطرح است. پروتیین‏های وابسته به خانواده سیستم ترشحی دوجزیی می‏تواند در چسبندگی باکتری نقش داشته باشد. هدف از انجام این تحقیق، شناسایی، مطالعه و بررسی نقش پروتیین‏های این خانواده در چسبندگی اسنیتوباکتر بومانی به سلول اپیتلیال انسانی است.مواد و روش‏ها: هومولوگ ژن‏های کد کننده پروتیین فیلامنت- هماگلوتینین وابسته به سیستم ترشحی دو جزیی در ژنوم اسنیتوباکتر بومانی با کمک نرم‏افزارهای بیوانفورماتیک در بانک ژنی تجزیه و تحلیل و سپس آغازگرها طراحی شد. بنابراین سازه‏های مورد نظر در ناقلpet22b سنتز و به سلول bl21(de3) ترانسفورم و سلول‏های تراریخت شده fhab1، fhab2 نامگذاری شدند. میزان بیان پروتیین‏های نوترکیب بر سطح غشای سلول مطالعه و در نهایت میزان چسبندگی و توانایی برای تشکیل بیوفیلم در سلول‏های نوترکیب، اسنیتوباکتر بومانی و سلول اشریشیا کلی bl21(de3) مقایسه شد.نتایج: بررسی‏های بیوانفورماتیک نشان داد که این باکتری توانایی تولید دو نوع اگزوپروتیین fhab1، fhab2 را داراست. بیان پروتیین‏های نوترکیب بر سطح خارجی سلول‏های تراریخت شده، با آزمایش‏های وسترن بلات و الایزای سلول کامل تایید شد. آزمایش‏ها نشان داد که این سلول‏های نوترکیب و اسنیتوباکتر بومانی نسبت به سلول اشریشیا کلی bl21(de3) توانایی بالاتری برای تشکیل بیوفیلم دارد. همچنین سلول‏های fhab1، fhab2 و اسنیتوباکتر بومانی نسبت به اشریشیا کلی bl21(de3) به میزان بیشتری به سطح سلول‏های اپیتلیال ریه انسانی اتصال می‏یابند. نتیجه‏گیری: سیستم ترشحی دو جزیی در اسنیتوباکتر بومانی یکی از عوامل چسبندگی و کلونیزاسیون بوده و از جمله عوامل بیماری‏زایی باکتری است.