ترانسداکشن لنتی ویروسی میکرو RNAlet-7f منجر به افزایش بیان ژن HNF4a در سلول‏های بنیادی جدا شده از بافت چربی انسانی می‏شود

هدف: میکروrna ها، rna های غیر کد کننده‏ای است که به‏عنوان تنظیم کننده چندین فعالیت زیستی مثل متابولیسم، تکثیر و تنظیم سلولی عمل می‏کند. مطالعات اخیر نشان دهنده پتانسیل بالای این مولکول‏های کوچک در تمایز سلول‏های بنیادی به سلول‏های مشخص است. هدف از مطالعه حاضر ارزیابی اثر let-7f بر بیان ژن عامل هسته‏ای کبد (hnf4a) و عوامل خاص کبدی از جمله آلبومین، آلفا فیتوپروتیین، سیتوکراتین 18 و سیتوکراتین 19 در سلول‏های بنیادی جدا شده از بافت چربی انسانی است.مواد و روش‏ها: سلول‏های بنیادی جدا شده از بافت چربی تحت تاثیر آنزیم کلاژناز نوع i از بافت چربی انسانی استخراج شده و سپس با استفاده از لنتی‏ویروس‏های حاوی مهار کننده let-7f و scramble (کنترل منفی) ترانسداکت شدند. سپس تغییر در سطح بیان ژن‏های hnf4a، آلبومین، آلفا فیتوپروتیین، سیتوکراتین 18 و سیتوکراتین 19 در زمان‏های متفاوت با استفاده از روش real-time pcr بررسی شد.نتایج: کارآیی ترانسداکشن ناقل‏های لنتی ویروسی در سلول‏های بنیادی جدا شده از بافت چربی انسانی بیش از 80 درصد بود که با بررسی بیان پروتیین فلورسانت سبز ارزیابی شد. نتایج real-time pcr نشان داد که مهار let-7f در سلول‏های بنیادی جدا شده از بافت چربی انسانی منجر به افزایش معنی‏دار در بیان ژن‏های خاص کبدی در مقایسه با کنترل منفی می‏شود. همچنین بیان ژن hnf4a روز چهاردهم بعد از ترانسداکشن افزایش داشت که تایید کننده سرکوب ژن hnf4a توسط let-7f است.نتیجه‏گیری: نتایج این تحقیق نشان داد که let-7f به‏عنوان یک تنظیم کننده منفی در بیان ژن hnf4a عمل می‏کند و مهار let-7f منجر به افزایش بیان نشانگرهای ویژه کبدی می‏شود. بنابراین مهار let-7f می‏تواند ابزار موثری در به راه‏اندازی تمایز سلول‏های بنیادی جدا شده از بافت چربی انسانی به سمت رده هپاتوسیتی باشد.