شناسایی آلودگی مایکوپلاسما سالیواریوم در کشت‏های سلولی با استفاده از روش Pcr

هدف: مایکوپلاسما سالیواریوم یکی از گونه‏های مایکوپلاسمای اصلی آلوده کننده کشت‏های سلولی محسوب می‏شود و می‏تواند آثار نامطلوبی را روی کشت‏های سلولی ایجاد کند؛ در نتیجه شناسایی این آلودگی و سرعت تشخیص آن، در کنترل و پیشگیری از این موضوع اهمیت دارد. هدف از این مطالعه شناسایی آلودگی مایکوپلاسما سالیواریوم در کشت‏های سلولی با استفاده از روش واکنش زنجیره پلیمرازی (pcr) بود.مواد و روش‏ها: به منظور راه‏اندازی pcr از سویه استاندارد مایکوپلاسما سالیواریوم و آغازگرهای اختصاصی این گونه براساس تکثیر قطعه‏ای از ژن 16srrna استفاده شد و در ادامه حساسیت و ویژگی این آزمون تعیین شد. نمونه‏های مورد بررسی پس از استخراج dna، از نظر آلودگی به جنس مایکوپلاسما و گونه سالیواریوم مورد آزمایش pcr قرار گرفتند. نتایج: در این مطالعه تعداد 62 نمونه از کشت‏های سلولی ارسالی به آزمایشگاه مرجع مایکوپلاسما در موسسه رازی مورد بررسی قرار گرفتند که از این تعداد 42 (75/67 درصد) نمونه از نظر آلودگی به جنس مایکوپلاسما و از این تعداد 15 (72/35 درصد) نمونه با ایجاد باند در 434 جفت باز از نظر آلودگی به گونه مایکوپلاسما سالیواریوم مثبت بودند. نتیجه‏گیری: با توجه به بالا بودن درصد آلودگی کشت‏های سلولی به مایکوپلاسما سالیواریوم، رعایت شرایط آسپتیک توسط پرسنل آزمایشگاه در مراحل آماده‏سازی و کار با کشت‏های سلولی توصیه می‏شود. ضمناً با بهره‏گیری از آغازگرهای مناسب و اختصاصی امکان شناسایی و تشخیص آلودگی به مایکوپلاسما سالیواریوم در آزمایشگاه‏های کشت سلولی، در کمتر از یک روز با استفاده از روش pcr امکان‏پذیر است.