|
|
شناسایی آلودگی مایکوپلاسما سالیواریوم در کشتهای سلولی با استفاده از روش PCR
|
|
|
|
|
نویسنده
|
رستمی زاده ویستا ,پوربخش سیدعلی ,اصلی اسماعیل ,حدادی اعظم
|
منبع
|
پژوهش هاي آسيب شناسي زيستي - 1392 - دوره : 16 - شماره : 3 - صفحه:109 -118
|
چکیده
|
هدف: مایکوپلاسما سالیواریوم یکی از گونههای مایکوپلاسمای اصلی آلوده کننده کشتهای سلولی محسوب میشود و میتواند آثار نامطلوبی را روی کشتهای سلولی ایجاد کند؛ در نتیجه شناسایی این آلودگی و سرعت تشخیص آن، در کنترل و پیشگیری از این موضوع اهمیت دارد. هدف از این مطالعه شناسایی آلودگی مایکوپلاسما سالیواریوم در کشتهای سلولی با استفاده از روش واکنش زنجیره پلیمرازی (pcr) بود.مواد و روشها: به منظور راهاندازی pcr از سویه استاندارد مایکوپلاسما سالیواریوم و آغازگرهای اختصاصی این گونه براساس تکثیر قطعهای از ژن 16srrna استفاده شد و در ادامه حساسیت و ویژگی این آزمون تعیین شد. نمونههای مورد بررسی پس از استخراج dna، از نظر آلودگی به جنس مایکوپلاسما و گونه سالیواریوم مورد آزمایش pcr قرار گرفتند. نتایج: در این مطالعه تعداد 62 نمونه از کشتهای سلولی ارسالی به آزمایشگاه مرجع مایکوپلاسما در موسسه رازی مورد بررسی قرار گرفتند که از این تعداد 42 (75/67 درصد) نمونه از نظر آلودگی به جنس مایکوپلاسما و از این تعداد 15 (72/35 درصد) نمونه با ایجاد باند در 434 جفت باز از نظر آلودگی به گونه مایکوپلاسما سالیواریوم مثبت بودند. نتیجهگیری: با توجه به بالا بودن درصد آلودگی کشتهای سلولی به مایکوپلاسما سالیواریوم، رعایت شرایط آسپتیک توسط پرسنل آزمایشگاه در مراحل آمادهسازی و کار با کشتهای سلولی توصیه میشود. ضمناً با بهرهگیری از آغازگرهای مناسب و اختصاصی امکان شناسایی و تشخیص آلودگی به مایکوپلاسما سالیواریوم در آزمایشگاههای کشت سلولی، در کمتر از یک روز با استفاده از روش pcr امکانپذیر است.
|
کلیدواژه
|
مایکوپلاسما سالیواریوم ,PCR ,آلودگی ,کشت سلول ,Mycoplasma salivarium ,Contamination ,Cell culture
|
آدرس
|
دانشگاه آزاد اسلامی واحد کرج, گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد کرج،کرج، ایران, ایران, موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی, آزمایشگاه رفرانس مایکوپلاسما، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، کرج، ایران, ایران, موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی, آزمایشگاه رفرانس مایکوپلاسما، موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، کرج، ایران, ایران, دانشگاه آزاد اسلامی واحد کرج, گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد کرج، کرج، ایران, ایران
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Authors
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|