جداسازی و شناسایی باکتری‌های نمک‌دوست تولیدکننده آنزیم آسپاراژیناز از دریاچه ارومیه

اهداف: مطالعه حاضر با هدف جداسازی و شناسایی باکتری‌های نمک‌دوست تولیدکننده آنزیم آسپاراژیناز از دریاچه ارومیه و تاثیر غلظت‌های مختلف نمک و دما بر میزان آسپاراژیناز ترشحی انجام شد.مواد و روش‌ها: برای جداسازی باکتری‌های تحمل‌کننده نمک و نمک‌دوست، نمونه‌های آب و لجن دریاچه ارومیه در محیط‌های mh و swn کشت داده شدند. سپس قدرت ترشح آسپاراژیناز جدایه‌ها در محیط m9 نمکی بررسی شد. میزان ترشح جدایه‌ها در غلظت‌های نمکی 10، 20، 30 و 40% و دماهای 30، 35، 37، 45 و °c50 بررسی شد. دو جدایه با توان ترشح آسپاراژیناز بالا پس از رنگ‌آمیزی گرم، از طریق توالی‌یابی ژن 16s rrna شناسایی شدند.یافته‌ها: در مطالعه حاضر، از 57 جدایه به‌دست‌آمده، 10 جدایه دارای توان ترشح آسپاراژیناز بودند و 2 جدایه a2 و a3 به‌عنوان جدایه‌های برتر انتخاب شدند. جدایه a3 در دمای °c35 و غلظت 10% نمک بزرگترین هاله (54میلی‌متر) و جدایه a2 در همین دمای 35 و غلظت 40% نمک بزرگترین هاله (52میلی‌متر) را ایجاد کرده‌اند. براساس نتایج بررسی مولکولی ژن 16s rrna، جدایه a2 شباهت 98/9درصدی به سویه هالوموناس الونگاتا و جدایه a3 شباهت 100درصدی به باسیلوس آریابهاتای داشتند.نتیجه‌گیری: باکتری‌های جداشده از دریاچه ارومیه منبع بالقوه‌ای از آنزیم آسپاراژیناز هستند. هالوموناس الونگاتا و باسیلوس آریابهاتای جداشده از دریاچه ارومیه می‌توانند برای تولید آسپاراژیناز با عوارض جانبی کمتر برای درمان بیمارن مبتلا به سرطان استفاده شوند.

Isolation and Identification of Halophilic Bacteria Producing Asparaginase Enzyme from Urmia Lake

Aims: The present study was aimed to investigate isolation and identification of halophil bacteria producing asparaginase from Urmia Lake and the effect of different salt concentrations and temperature on asparaginase production.Materials Methods: The water and mud samples from Urmia Lake were cultivated in MH and SWN media for isolation of halotolerant bacteria. Then, the asparaginase production rate was investigated in saline M9. The asparaginase production rate by isolates was investigated in different salt concentrations (10, 20, 30, and 40%) and temperatures (30, 35, 37, 45, and 50 °C). Two isolates with a high production rate of asparaginase were stained by gram stain method and were identified by 16S rRNA sequencing.Findings: In the present study, 57 isolates were obtained which 10 isolates showed asparaginase production. Among these, 2 isolates (A2 and A3) were selected as superior isolates. The isolate A3 has shown the largest halo (54mm) at 35 °C and 10% salt concentration. Moreover, the isolate A2 has shown the largest halo (56mm) at 35 °C and 40% salt concentration. The 16SrRNA sequencing showed that the A2 isolate was similar 98.9% to the Halomonas elongata strain, and the A3 isolate was similar 100% to the Bacillus aryabhattai strain.Conclusion: The bacteria isolated from Urmia Lake are potential source of asparaginase enzyme. H. elongate and B. aryabhattai strains isolated from Urmia Lake can be used to production of asparaginase without side effects for cancer patients.