نقش جهش در آنزیم آرسنات/آنتیموان‌ردوکتاز در ایزوله‌های لیشمانیا تروپیکای مقاوم به گلوکانتیم در ایران

اهداف: گلوکانتیم سال هاست که به عنوان داروی انتخابی برای درمان لیشمانیوز جلدی استفاده می شود. در سال های اخیر مقاومت در برابر گلوکانتیم به طور فزاینده ای در برخی از مناطق ایران گزارش شده است. در انگل لیشمانیا آرسنات/ آنتیمونات ردوکتاز بر مبنای متابولیزم تیول عمل می کند؛ این آنزیم می تواند الکترون را از گلوتاردوکسین کاهش یافته به آنتیموان پنج ظرفیتی و آرسنات اهدا کند و آنها را به آنتیموان سه ظرفیتی و آرسنیت کاهش دهد. فرض شده است که یک جهش عملکردی در آنزیم می تواند به مقاومت درمانی منجر شود. در این مطالعه نقش پروتئین آرسنات/ آنتیموان ردوکتاز لیشمانیا تروپیکا در ایجاد مقاومت نسبت به گلوکانتیم مورد بررسی قرار گرفته است.مواد و روش ها: در مطالعه تجربی حاضر 15 نمونه حساس و 15 نمونه مقاوم به گلوکانتیم از بیماران مبتلا به لیشمانیازیس جلدی، از مناطق مختلف ایران جمع آوری شد. برای تشخیص موتاسیون از پرایمرهای دژنره طراحی شده و تکنیک های توالی یابی و شبیه سازی براساس روش دینامیک مولکولی استفاده شد.یافته ها: در جدایه های مقاوم به لیشمانیا تروپیکا، فقط یک جهش به صورت جایگزینی آمینواسید آلانین در موقعیت 80 به جای آمینواسید والین دیده شد. آنالیز شعاع ژیراسیون هیچ گونه افزایش شعاعی را در زمان شبیه سازی نشان نداد.نتیجه گیری: جهش در جدایه های مقاوم به گلوکانتیم موجب تغییر در جایگاه فعال یون آنتیموان نشده است.

Role of Mutation in Sb (V)-As (V) Reductase Enzyme of Leishmania tropica Isolates Resistant to Glucantim in Iran

Aims: Glucantime has been considered as a drug of choice for treating cutaneous leishmaniasis for many years. In the recent years, resistance to Glucantime has been increasingly reported in some regions of Iran. In the Leishmania, Arsenate/Antimony reductase acts on the basis of thiol metabolism; it can donate the electron from reduced glutaredoxin to pentavalent (sbV) antimony and arsenate and reduce them to trivalent (sbIII) antimony and arsenite, based on its enzymatic property. It has been assumed that a functional mutation in the enzyme can result in drug resistance. In the present study, the role of Sb (V)As (V) reductase of Leishmania tropica in drug resistant to glucantime was investigated.Materials and Methods: In the present experimental research, 15 glucantime sensitive samples and 15 glucantime resistant specimens were collected from different regions of Iran through patients with cutaneous leishmaniasis. For mutation detection, first degenerate primers were designed; then, sequencing and simulation techniques were used based on molecular dynamics method.Findings: In Leishmania tropicaresistant isolates, only one mutation was seen as replacing alanine (Ala) at position 80 instead of valine (Val). The analysis of the radius of gyration did not reveal any increase in the radius of gyration while simulation.Conclusion: Mutations in glucantimeresistant isolates did not significantly change simulated active site of antimony ion.